Desarrollo de una técnica de PCR para la detección de Fowl adenovirus 4 (FADV-4) en muestras de tejidos

Es importante contar con una técnica de PCR capaz de detectar adenovirus aviar 4 con una alta sensibilidad y precisión en cultivos celulares y muestras de origen aviar. En el presente trabajo se estandarizó una técnica de PCR. Primero se procedió a la preparación del Material de Referenc...

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Veröffentlicht in:	Revista de investigaciones veterinarias del Perú 2021-04, Vol.32 (2), p.e18110
Hauptverfasser:	Chávez-Montenegro, Víctor, Longa-Bobadilla, Vladimir, Ormeño-Vásquez, Phillip, Tataje Lavanda, Luis, Fernández Díaz, Manolo
Format:	Artikel
Sprache:	spa
Schlagworte:	AGRICULTURE, DAIRY & ANIMAL SCIENCE AGRICULTURE, MULTIDISCIPLINARY ENTOMOLOGY ENVIRONMENTAL SCIENCES ORNITHOLOGY VETERINARY SCIENCES ZOOLOGY
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description	Es importante contar con una técnica de PCR capaz de detectar adenovirus aviar 4 con una alta sensibilidad y precisión en cultivos celulares y muestras de origen aviar. En el presente trabajo se estandarizó una técnica de PCR. Primero se procedió a la preparación del Material de Referencia Interna (M.R.I.), usando el cultivo celular en células EB66, infectado FAdV-4; luego se purificó el virus, se extrajo el ADN y se cuantificó el amplicón. Finalmente se procedió a realizar la prueba de la gradiente de temperatura, prueba de concentración de cebadores, prueba de sensibilidad y prueba de especificidad utilizando el kit de PCR Q5® High-Fidelity 2X Master. De los cinco cebadores utilizados, los cebadores HHS-3 y HHS-4 pasaron todas las pruebas, siendo HHS*-3 el más sensible ya que detectó hasta 1 pg/µl.
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En el presente trabajo se estandarizó una técnica de PCR. Primero se procedió a la preparación del Material de Referencia Interna (M.R.I.), usando el cultivo celular en células EB66, infectado FAdV-4; luego se purificó el virus, se extrajo el ADN y se cuantificó el amplicón. Finalmente se procedió a realizar la prueba de la gradiente de temperatura, prueba de concentración de cebadores, prueba de sensibilidad y prueba de especificidad utilizando el kit de PCR Q5® High-Fidelity 2X Master. De los cinco cebadores utilizados, los cebadores HHS-3 y HHS-4 pasaron todas las pruebas, siendo HHS-3 el más sensible ya que detectó hasta 1 pg/µl.</description><identifier>ISSN: 1609-9117</identifier><identifier>EISSN: 1609-9117</identifier><identifier>DOI: 10.15381/rivep.v32i2.18110</identifier><language>spa</language><publisher>Universidad Nacional Mayor de San Marcos</publisher><subject>AGRICULTURE, DAIRY & ANIMAL SCIENCE ; AGRICULTURE, MULTIDISCIPLINARY ; ENTOMOLOGY ; ENVIRONMENTAL SCIENCES ; ORNITHOLOGY ; VETERINARY SCIENCES ; ZOOLOGY</subject><ispartof>Revista de investigaciones veterinarias del Perú, 2021-04, Vol.32 (2), p.e18110</ispartof><rights>COPYRIGHT 2021 Universidad Nacional Mayor de San Marcos</rights><rights>This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License.</rights><oa>free_for_read</oa><woscitedreferencessubscribed>false</woscitedreferencessubscribed><orcidid>0000-0003-3554-6292</orcidid></display><links><openurl>$$Topenurl_article</openurl><openurlfulltext>$$Topenurlfull_article</openurlfulltext><thumbnail>$$Tsyndetics_thumb_exl</thumbnail><link.rule.ids>230,314,776,780,881,27901,27902</link.rule.ids></links><search><creatorcontrib>Chávez-Montenegro, Víctor</creatorcontrib><creatorcontrib>Longa-Bobadilla, Vladimir</creatorcontrib><creatorcontrib>Ormeño-Vásquez, Phillip</creatorcontrib><creatorcontrib>Tataje Lavanda, Luis</creatorcontrib><creatorcontrib>Fernández Díaz, Manolo</creatorcontrib><title>Desarrollo de una técnica de PCR para la detección de Fowl adenovirus 4 (FADV-4) en muestras de tejidos</title><title>Revista de investigaciones veterinarias del Perú</title><addtitle>Rev. investig. vet. 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