Detección por PCR de Guignardia bidwellii, agente causal de la pudrición negra de la vid

Guignardia bidwellii (anamorfo: Phyllosticta ampelicida) es el agente etiológico de la pudrición negra de la vid, enfermedad de importancia económica en Europa y cuarentenaria para México. La identificación del estado anamorfo mediante caracteres morfológicos resulta complicada debido a la similitud entre especies del mismo género, por ejemplo, con el endófito cosmopolita G. endophyllicola (P. capitalensis), por lo que es necesario contar con herramientas de diagnóstico rápidas y específicas. Con este propósito se desarrolló un marcador molecular basado en los polimorfismos de un solo nucleótido (SNP) en la región ITS del ADNr, donde se diseñaron los oligos Bidwell y Ampel2 que mediante amplificación PCR generan un fragmento de 173 pb específico a G. bidwellii f. euvitis. La validación del método demostró que no hay amplificación cruzada con otros hongos fitopatógenos ni con el genoma de la vid. La técnica fue sensible al detectar hasta 30 pg µL-1 de ADN a partir de cultivos monospóricos y en mezcla con tejido vegetal. Se presenta este procedimiento de diagnóstico como una opción rápida y específica para el monitoreo y detección de G. bidwellii f. euvitis en apoyo a las estrategias de prevención, manejo, cuarentena y erradicación de la enfermedad.