Quantitation of Streptococcus mutans by the membrane filter fluorescent antibody technique

The aetiologic relationship of Streptococcus mutans to human dental caries may be of a quantitative nature. For the quantitation of these organisms, the fluorescent antibody technique (FA) was adapted for use in conjunction with the membrane filter technique. Membrane filters with a porosity of 0.45 μm were adequate for doing total colony counts of the oral flora and for screening Strep, mutans strains AHT, BHT, GS-5 and B13, Bratthall serotypes a, b, c and d, respectively. In the FA technique, the filters containing the samples were incubated anaerobically overnight on mitis-salivarius agar (Difco). Total colonies were counted and the filters were then stained for 30 min with fluorescein-labelled antisera specific for strains AHT and GS-5. The short incubation time was a distinct advantage. The Strep. mutans colonies were small and showed a sharp, bright fluorescence following staining. They could readily be differentiated from autofluorescent colonies which were much larger and had a hazy fluorescence. In addition, a bivalent fluorescent antiserum mixture was useful in quantitating strains AHT and GS-5 in one step. It is suggested that a mixture of a broader range of antisera to cover all serotypes of Strep. mutans could be useful in the total quantitation of Strep. mutans in dental plaque samples. Le rapport étiologique entre le Streptococcus mutans et les caries dentaires humaines pourrait être d'une nature quantitative. Pour la quantification de ces microorganismes on a adapté la technique d'anticorps fluorescents (AF) àêtre utilisée conjointement avec la technique du filtre membraneux. Les filtres membraneux avec une porosité de 0,45 μm étaient adéquats pour faire des numérations de colonies, totales, de la flore orale et pour l'examen collectif des races de Strep. mutans AHT, BHT, GS-5 et B13, les sérotypes Bratthall respectivement les a, b, c, d. Dans la technique AF, les échantillons contenant les filtres ont été incubés anaérobiquement durant la nuit sur agar mitis salivarius (Difco). On a compté les colonies totales et puis les filtres ont été colorés pendant 30 min avec d'antisérums spécifiques étiquetés avec fluorescéine pour les races AHT et GS-5. L'incubation de courte durée était d'un net avantage. Les colonies de Strep. mutansétaient petites et montraient après la coloration une fluoréscence vive, brillante. Elles pouvaient être différenciées facilement des colonies autofluoréscentes qui étaient beaucoup plus grandes et avaient une fluorés