Preparation and isolation of immunologically active glycopeptides from carcinoembryonic antigen (CEA)

In order to determine the structure of the tumor‐specific immunodominant group of the carcinoembryonic antigen (CEA) of human gastro‐intestinal tumors, immunologically active fragments from this glycoprotein were prepared by partial enzymatic hydrolysis using the proteolytic enzyme nagase. The fragments were purified by sequential molecular sieve, adsorption and ion exchange chromatography, and were analysed for carbohydrate and amino‐acid composition by gas‐liquid chromatography. The antigenic activity of each fragment was tested using both the Z‐gel and Farr radioimmunoassay techniques for CEA. Immunologically active glycopeptides with molecular weights of 1,000–5,000 Daltons, which contained the tumor antigenic determinant of CEA, had relatively high contents of N‐acetyl‐D‐glucosamine, aspartic acid or asparagine, and glutamic acid or glutamine. Préparation et Isolement de Glycopeptides Immunologiquement Actifs Provenant de L'Antigène Carcino‐Embryonnaire (Cea) Pour déterminer la structure du groupe immunodominant spécifique de la tumeur dans l'antigène carcino‐embryonnaire (CEA) des tumeurs gastrointestinales humaines, des fragments immunologiquement actifs de cette glycoprotéine ont été préparés par hydrolyse enzymatique partielle au moyen de l'enzyme protéolytique nagase. Les fragments ont été purifiés par chromatographie sur tamis moléculaires, par adsorption et par échange d'ions, et leur composition en glucides et acides aminés a été analysée par chromatographie de partage gaz‐liquide. L'activité antigénique de chaque fragment a été étudiée par la technique du Z‐gel et au moyen d'un dosage radioimmunologique (technique Farr) du CEA. Les glycopeptides immunologiquement actifs, d'un poids moléculaire de 1,000 à 5,000 daltons, qui contenaient le déterminant antigénique du CEA, avaient une forte teneur en N‐acétyl‐D‐glucosamine, acide aspartique ou asparagine, et acide glutamique ou glutamine.