Relationships between renal cytoplasmic and nuclear aldosterone-receptors

Relationships between renal cytoplasmic and nuclear aldosteronereceptors.Three 3H-aldosterone receptor complexes have been recovered from rat kidneys: 1) cytosol (high speed supernatants), 2) Tris-soluble nuclear (obtained by an osmotic shock procedure), and 3) chromatin-bound (prepared by extracting post-shock nuclei with 0.4 M KCl).Glycerol density gradient analyses of cytosol labelled in vivo or in vitro with 3H-aldosterone yielded two specific peaks -4.5S and 8.5S.These peaks were sensitive to salt concentration; 0.4 M KCl shifted the 8.5S to 4.5S and the addition of Ca++ (6 mM) resulted in a further shift to 3.5S.The Tris-soluble nuclear species sedimented at 3S and the chromatin-bound species at 4S.The time-course of generation of the 3H-aldosterone-labelled cytosol and nuclear receptor species was studied in vivo and in vitro by tissue slice and reconstitution methods.The results obtained are consistent with a three-step mechanism: cytosol (8.5S or 4.5S)→ Tris-soluble nuclear (3S)→ chromatin-bound (4S).Alternatively, the 3S and 4S complexes may be attached to independent nuclear sites.The formation of the chromatin-bound species was temperature sensitive and failed to form at 0°C.Pre-treatment with DNase but not RNase impaired the generation of both the Tris-soluble nuclear and chromatin-bound species.These results imply a close association between nuclear aldosterone-receptor complexes and intact DNA. Rapport entre les récepteurs cytoplasmiques et nucléaires d'Aldostérone au niveau du rein.Trois systèmes récepteurs de l'Aldostérone-3H ont été obtenus à partir de reins de rats: 1) cytosol (surnageants d'ultracentrifugation), 2) nucléaires solubles dans le Tris (obtenus par un procédé de choc osmotique) et 3) liés à la chromatine (extraction par KCl 0,4 M après choc des noyaux).L'analyse du cytosol marqué in vivo et in vitro par de l'Aldostérone 3H en gradient de densité sur glycérol a mis en évidence deux pics spécifiques -4,5 S et 8,5 S.Ces pics dépendent de la concentration en sel: le KCl 0,4 M déplace le pic 8,5 S vers 4,5 S et l'addition de Ca++ (6 mM) provoque un nouveau déplacement vers 3,5 S.Le récepteur nucléaire soluble dans le Tris sédimente à 3 S et le récepteur lié à la chromatine à 4 S.La cinétique de formation des récepteurs cytoplasmiques et nucléaires marqués par l'Aldostérone 3H a été étudiée in vivo et in vitro par les méthodes de coupes de tissus et de reconstitution.Les résultats sont compatibles un mécanisme à trois étapes cytos