Characterization of plasma membranes isolated from rat submandibular salivary glands

Three fractions enriched in plasma membranes, of approximate densities 1.0, 1.12 and 1.15, were isolated from homogenates of rat submandibular salivary gland by differential centrifugation in discontinuous sucrose gradients. They contained about 10 times more cholesterol and phospholipid than the original whole homogenate in relation to their protein content. The molar ratio of cholesterol to phospholipid varied from 0.9 to 1.1. Sialoprotein was found in all membrane fractions. These plasma membrane fractions exhibited no acyl-CoA synthetase activity but readily utilized [1- 14C]-palmitoyl-CoA for the formation of phospholipid and triglyceride. The addition of lysolecithin or lysophosphatidylethanolamine markedly increased the labelling in lecithin and phosphatidylethanolamine respectively. Trois fractions, riches en membranes cytoplasmiques, de densités 1,0, 1,12 et 1,15, sont isolées à partir d'homogénats de sous-maxillaires de rat par centrifugation différentielle, en gradients discontinus de saccharose. Elles contiennent environ 10 fois plus de cholestérol et de phospholipide que l'homogénat total initial par rapport au contenu protéique. Le rapport molaire du cholestérol par rapport au phospholipide varie de 0,9 à 1,1. Une sialoprotéine est retrouvée dans chaque fraction membranaire. Ces fractions de membranes cytoplasmiques ne présentent pas d'activité en acyl-CoA-synthétase, mais utilisent [1- 14C]-palmitoyl-CoA pour la formation de phospholipide et triglycéride. L'adjonction de lysolécithine ou lysophosphophatidylethanolamine augmente nettement le marquage de lécithine et de phosphatidylethanolamine respectivement. Drei Fraktionen angereicherter Plasmamembranen mit Dichten von 1,0, 1,12 und 1,15 wurden aus Homogenaten der Submandibularspeicheldrüsen von Ratten durch Differentialzentrifugation mit unregelmäβigen Rohrzuckergradienten isoliert. Sie enthielten, bezogen auf den Eiweiβgehalt, etwa 10 ml mehr Cholesterin und Phospholipid als das ursprüngliche Gesamthomogenat. Die molare Cholesterin-Phospholipidrate schwankte zwischen 0,9 und 1,1. Sialoprotein wurde in allen Membranfraktionen gefunden. Diese Plasma-Membranfraktionen entwickelten keine Acyl-CoA-Synthetaseaktivität, jedoch verarbeiteten sie [1- 14C]-Palmitoyl-CoA zur Bildung von Phospholipid und Triglyceriden. Der Zusatz von Lysolecithin oder Lysophosphatidyläthanolamin steigerte die Markierung in Lecithin bzw. Phosphatidyläthanolamin erheblich.