Influence of two cell harvesting methods on intracellular ATP and amino acid concentrations in human fibroblast cultures

Les concentrations de l'ATP et des acides aminés intracellulaires ont été déterminées dans des cultures de fibroblastes d'origine humaine proche de la confluence. Les valeurs obtenues sont très différentes suivant la technique choisie pour recueillir les cellules. L'utilisation de la trypsine paraît être la meilleure méthode pour évaluer la concentration de l'ATP (21,25 ± 0,96 nmol par mg de protéine), ce taux étant beaucoup plus faible si la récolte est effectuée par grattage. En revanche, il est préférable de recueillir les cellules par grattage pour déterminer le taux des acides aminés intracellulaires. Ce travail a pour but de souligner l'importance du choix des méthodes de récolte des cellules avant d'effectuer des études métaboliques sur cultures cellulaires. The intracellular ATP and amino acid concentrations were determined in human fibroblast cultures reaching confluence. The values obtained were very different, depending on the cell harvesting method: trypsinization or scraping. Trypsinization appeared to be the better method for measuring the ATP concentrations (21.25 ± 0.96 nmol per mg cell protein), this level being much lower with scraping. On the contrary, scraping was the most appropriate method for amino acid measurement. This work underlines the importance of harvesting methods for metabolic studies in human cell cultures.