Evaluation of sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis purified proteins of Mycoplasma gallisepticum and M. synoviae as antigens in a dot-enzyme-linked immunosorbent assay

Selected immunogenic proteins of Mycoplasma gallisepticum (MG) strain R and M. synoviae (MS) isolate F10-2AS were purified from sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gels. Purified MG proteins of 65 to 63 (p64) kilodaltons (kDa), and 26 and 24 (p26/24) kDa, and purified MS proteins of 53 (p53) kDa, 41 (p41) kDa, and 22 (p22) kDa were evaluated as potential antigens for an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Chicken antisera to MG, MS, or oil-emulsion vaccines were used to evaluate these purified proteins as antigens in a dot-ELISA. MG antigen p64 detected antibodies 3 days after the serum plate agglutination (SPA) test and 7 days before the hemagglutination-inhibition (HI) test. Antigen p64 detected antibodies to 12 MG isolates, and in sera from field outbreaks of MG. No cross-reactions with MS-positive antisera were seen with antigen p64. MG antigen p26/24 did not perform as well as p64. MS antigen p41 detected antibodies 5 days after the SPA test and at least 11 days before the HI test, and in sera from field outbreaks of MS. However, some MG-positive antisera reacted with p41. MS antigens p53 and p22 did not perform well. /// Se seleccionaron bandas protéicas inmunogénicas de la cepa R de Mycoplasma gallisepticum (MG) y de la cepa F10-2AS de M. synoviae. Las bandas fueron purificadas de geles de poliacrilamida con sulfato dodecílico de sodio. Bandas purificadas de MG de 65 a 63 (p64) kilodaltons (kDa) y 26/24 (p26/24) kDa, y bandas purificadas de MS de 53 (p53) kDa y 22 (p26/24) kDa fueron evaluadas como antígenos potenciales en un inmunoensayo con enzimas asociadas (ELISA). Para evaluar los antígenos en una prueba puntual ELISA, se usaron antisueros de pollo contra MG, MS, o vacunas emulsionadas en aceite. El antígeno p64 detectó anticuerpos 3 días después de la prueba de aglutinación del suero en placa y 7 días antes que la prueba de inhibición de la hemoaglutinación (HI). El antígeno p64 detectó anticuerpos contra 12 cepas de MG, lo mismo que en suero obtenido de brotes de MG en el campo. Con el antígeno p64, no se observaron reacciones cruzadas con antisuero positivo contra MS. El otro antígeno MG, p26/24, no trabajó tan bien como el p64. El antígeno MS p41 detectó anticuerpos 5 días después de la prueba rápida del suero en placa y al menos 11 días antes que la prueba de HI. Lo mismo sucedió en muestras de suero obtenidas de brotes de campo. Sin embargo, algunos antisueros positivos contra MG reaccionaron con el antígeno p41. Los antígenos p5