An enzyme-linked immunosorbent assay for detection of antibodies against Escherichia coli: association between indirect hemagglutination test and survival

An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was modified for detection of antibodies against the two main pathogenic serotypes of Escherichia coli: serotypes O78:K80 and O2:K1. The ELISA was a more sensitive and repeatable test than the indirect hemagglutination test (IHT), which is a common method for detecting antibodies against E. coli. Cross-reactivity between the two strains was measured by reacting antisera of each serotype against homologous and heterologous antigens. The results suggest that aside from similar determinants expressed by the two serotypes, serotype O2:K1 expresses more strain-specific determinants than does O78:K80. Comparison of mean antibody titers of immunized chicks by IHT and ELISA along the primary response revealed that during the first 15 days after immunization with inactivated E. coli, the titers in both tests were parallel. After 15 days post-immunization, antibody titers measured by IHT decreased rapidly, whereas titers measured by ELISA decreased only slightly. In addition, a higher correlation was found between titers detected by ELISA and survival through challenge with E. coli than between titers detected with IHT and survival through challenge. The results suggest that the ELISA is a better test for detection of antibody in flocks suspected of being infected with E. coli. /// Se modificó un inmunoensayo indirecto con enzimas asociadas (ELISA) para detectar anticuerpos contra los dos serotipos más importantes de Escherichia coli: O78 y O2. La prueba ELISA fue más sensible y reproducible que la prueba de hemoaglutinación indirecta que es el método comunmente utilizado para detectar anticuerpos contra E. coli. La reacción cruzada entre las dos cepas fue medida reaccionando antisueros de cada uno de los serotipos contra antígenos homólogos y heterólogos. Los resultados sugieren que además de los determinantes similares expresados por los dos serotipos, el serotipo O2 expresa más determinantes específicos de cepa que el serotipo O78. Los promedios de los títulos de anticuerpos obtenidos en pollitos inmunizados fueron comparados por medio de la prueba de hemoaglutinación indirecta y la prueba ELISA. Los resultados revelaron que durante los primeros 15 días después de la inmunización con E. coli inactivado, los títulos en ambas pruebas fueron paralelos. Después de 15 días de inmunización, los títulos de anticuerpos medidos por la prueba de hemoaglutinación indirecta disminuyeron rápidamente mientras que los títulos medidos