Glycolipid antigen for use in diagnostic assays for bovine tuberculosis

A glycolipid antigen, was isolated, purified and characterized from Mycobacterium bovis An5. Chemical analysis (thin-layer chromatography, nuclear magnetic resonance and infrared spectra) showed that this glycolipid was a 2,3-di- O-acyl trehalose (DAT), similar to the DAT of M. tuberculosis. This antigen was used to establish ELISA-based serodiagnostic tests for M. bovis-infected cattle. The sensitivity and specificity of the assay were investigated using sera of cattle from tuberculosis-free herds and from tuberculosis-infected herds. No correlation was found between DAT-ELISA and the skin test, nor between DAT-ELISA and interferon-γ with bovine purified protein derivative. The antibody titres were not related to cell-mediated immunity. Although the antigen was highly specific (95.9%), the sensitivity of DAT-ELISA, as judged from assays in bacteriologically confirmed tuberculosis, was low (29 to 36.8%). The low sensitivity of ELISA might also be attributed to a reciprocal relationship between B-cell proliferation and T-cell protective immunity. Un antigène glycolipidique a été isolé, purifié et caractérisé à partir de Mycobacterium bovis An5. L'analyse chimique conjuguée à la spectroscopie infrarouge et à la résonance magnétique nucléaire a montré que ce glycolipide était un diacyl-tréhalose (DAT) — le 2,3-di- O-acyl tréhalose — semblable à celui de M. tuberculosis. Cet antigène a été utilisé pour la mise au point d'un ELISA pour le sérodiagnostic des bovins infectés par M. bovis. La sensibilité et la spécificité de l'ELISA ont été étudiées à l'aide des sérums de bovins provenant de troupeaux indemnes de tuberculose et de troupeaux infectés par M. bovis. Aucune corrélation n'a été mise en évidence entre l'ELISA-DAT et l'intradermotuberculination, et entre l'ELISA-DAT et l'interféron gamma. Il semble que les titres d'anticorps ne soient pas liés à l'immunité cellulaire. Bien que l'antigène soit hautement spécifique (95,9%), la sensibilité de l'ELISA-DAT, d'après les essais confirmant bactériologiquement la tuberculose, est faible (29 à 36,8 %). La faible sensibilité de l'ELISA pourrait également être attribuée à une relation réciproque entre la prolifération des cellules B et l'immunité protectrice due aux cellules T.