Immunological activities of RU-41740, a glycoprotein extract from Klebsiella pneumoniae: III. Role of LPS-like and LPS-non-related molecules

RU-41740, a glycoprotein complex extracted from Klebsiella pneumoniae, is an immunomodulating agent which acts on B cells and macrophages. It has been shown that RU-41740 is composed mainly of two macromolecular fractions, F1, having an LPS-related structure, and P1, with a proteoglycan structure. In the present paper, the effects of these molecules on B cells and on IL-1 and tumour necrosis factor (TNF), production by macrophages were compared. Data reveal that both fractions were mitogenic for murine B cells and induced IL-1 and TNF production by macrophages. The LPS-like fraction (F1) was sensitive to polymyxin B and was unable to activate macrophages and spleen cells from LPS non-responder mice. The P1 fraction was mitogenic for B cells and induced the production of IL-1 and TNF activities by macrophages from LPS non-responder C3H/HeJ mice. The cytotoxic activity was due to TNFα, since treatment with anti-TNFα antiserum abrogated the lytic activity of supernatants from stimulated macrophages. The differences observed between P1 and F1 fractions in terms of sensitivity to polymyxin B and activity towards C3H/HeJ spleen cells and macrophages suggest that the two structurally distinct molecules isolated from RU-41740 could act at different sites on immunocompetent cells. Le RU-41740 est un extrait glycoprotéique de Klebsiella pneumoniae doué d'activité immunostimulante in vivo et in vitro. In vitro il est mitogène pour les cellules B et stimule la production d'IL-1 et de TNF (tumour necrosis factor) par les macrophages. L Les études biochimiques montrent que le RU-41740 est composé de deux molécules principales F1 et P1. La fraction P1 (95 kDa) est de nature protéoglycanique et constitute 50% du RU-41740. La fraction F1 (350 kDa) constitute 20% du RU-41740 et possède une structure de type lipopolyosidique (LPS) associée à une protéine. Dans ce travail nous étudions les propriétés de ces deux molécules sur les cellules B et sur la production d'IL-1 et de TNF par les macrophages. Les résultats montrent que les deux fractions F1 et P1 sont mitogènes pour les cellules B de souris et qu'elles induisent la production d'IL-1 et une activité cytotoxique par les macrophages murins. La fraction F1 est sensible à l'action de la polymyxine B et elle est inactive sur les macrophages et sur les cellules spléniques de souris C3H/HeJ. La fraction P1 est active sur les cellules B et sur les macrophages de souris C3H/HeJ qui ne répondent pas au LPS. L'activité cytotoxique