Chemical structure of 3-carbethoxypsoralen-DNA photoadducts

The enzymatic digest from salmon sperm DNA photochemically modified by the monofunctional 3-carbethoxypsoralen was analyzed by high-performance liquid chromatography. The modified nucleosides extracted from DNA were compared with model compounds obtained from irradiation in the dry state of mixtures of 3-carbethoxypsoralen with 2′-deoxyribonucleosides whose chemical structures had previously been characterized. The main photoadducts formed in DNA are two cis-syn diastereoisomers formed via a C 4-cycloaddition reaction involving the 4′, 5′ double bond of 3-carbethoxypsoralen and the 5,6 double bond of 2′-deoxythymidine. Among them, the most polar one accounts for 72%. Under the same conditions, photoadducts formed between 3-carbethoxypsoralen and 2′deoxycytidine account for less than 1%. Nous avons analysé, par chromatographie liquide de haute performance, les désoxyribonucléosides résultant de l'hydrolyse enzymatique de DNA de sperme de saumon modifié photochimiquement en présence de carbéthoxy-3-psoralène, dérivé monofonctionnel du psoralène. Leur comportement chromatographique a été comparé à celui de composés modèles résultant de l'irradiation, en film solide, de mélanges de carbéthoxy-3-psoralène avec des désoxyribonucléosides et dont nous avions établi les structures chimiques dans une étude précédente. Les deux photoproduits majoritaires observés dans le DNA sont deux diastéréoisomères de configuration cis-syn formés via une réaction de C 4-cycloaddition mettant en jeu les doubles liaisons 4′, 5′ du carbéthoxy-3-psoralène et 5,6 de la désoxy-2′-thymidine. Parmi eux, le diastéréoisomère le plus polaire est formé en quantité prépondérante (72%). Dans les mêmes conditions les produits de photoaddition du carbéthoxy-3-psoralène avec la désoxy-2′-cytidine représentent moins de 1% des photoadduits.