Polymerase chain reaction with the 30-kb circular plasmid of Borrelia burgdorferi B31 as a target for detection of the Lyme borreliosis agents in cerebrospinal fluid

The polymerase chain reaction (PCR) was developed for use in the detection of Borrelia burgdorferi sensu lato, the Lyme disease agent. A 333-bp fragment of the 30-kbp circular plasmid from Borrelia burgdorferi B31 was amplified and PCR products were analysed by DNA-DNA hybridization. Sensitivity was enhanced by addition of a carrier to the samples before treatment and enabled detection of as few as 1 to 10 bacteria. Specific products were obtained only with the lyme disease agents, but not with other spirochetes or unrelated bacteria. B. burgdorferi sensu lato was detected in cerebrospinal fluid (CSF) from 11 out of 45 patients with confirmed Lyme neuroborreliosis. In a prospective study, 20 out of 315 CSF samples from potential patients were PCR-positive. Forty uninfected patients were PCR-negative. Un test d'amplification génique (PCR) a été développé pour la détection de Borrelia burgdorferi sensu lato, agents de la maladie de Lyme. Un fragment de 333 bp provenant du palsmide circulaire de 30 kb de B. burgdorferi B31 a été amplifié et les produits d'amplification analysis analysis par hybridation ADN/ADN. L'addition d'un entraîneur aux échantillons avant traitement a permis d'augmenter la sen sibilité Des produits spécifiques ont été obtenus uniquement avec les agents de la maladie de Lyme et pas avec d'autres spirochètes ou d'autres bactéries plus éloighées. B. burgdorferi sensu lato a été détectée dans le liquide céphalorachidien (LCR) de ll patients sur 45 dont la neuroborréliose de Lyme avait été confirmée. Dans une étude prospective, 20 des 315 énhantillons de LCR étaient PCR +; 40 patients non infectés étaient PCR −.