Histamine determination in tears as an index of safety in use of cosmetic products

Synopsis To assess ocular irritancy caused by chemical and cosmetic products a reliable method based on evaluation of histamine (Hm) in tears is presented. Hm is measured at picomole levels by HPLC and fluorimetric detection after fluorescamine‐HM derivatization. In order to avoid any uncontrolled irritation and stimulation of the conjunctiva during sample collection, a procedure of conjunctiva lavage was developed. A balanced salt solution (50 μl) containing a known amount of Hm‐fluorophore as reference standard is instilled in the conjunctiva fornix. After a few seconds 20 μl of tear fluid is collected: 10 μl are immediately analysed and 10 μl after derivatization reaction. In this way it is possible to evaluate tear dilution and to assess Hm content in less than 10 minutes. In a group of 20 normal subjects Hm has been determined in comparison with that of two volunteers after topical application of 50 μ of 0.2% and 0.4% sodium lauryl sulphate solution. A contact of 30 seconds of the cosmetic ingredient caused an immediate dose‐dependent Hm release through a direct cytotoxic damage of cell membranes due to the surfactant action. Évaluation de l'irritation occulaire due aux cosmétiques par la détermination de l'histamine lacrimale Résumé De manière àévaluer l'irritation occulaire provoquée par les produits chimiques et cosmétiques, nous avons voulu présenter dans cet article une méthode basée sur l'évaluation de la teneur en histamine (Hm) dans les larmes. L'histamine est mesurée au niveau de picomoles en chromatographie en phase liquide et en détection fluorimétrique après la dérivatisation fluorescamine/histamine. Pour éviter toute irritation ou stimulation incontrôlée de la conjonctive pendant la prise de l'échantillon, un procédé de lavage de la conjonctive a été mis au point. En prenant pour base 50 μl d'une solution saline contenant une quantité connue d'histamine fluorophore on instille cette solution dans le cul‐de‐sac inférieur de la conjonctive. Quelques secondes après on préleve 20 μl: 10 μl sont analysés immédiatement et 10 μl après la réaction de la dérivatisation. De cette manière il est done possible d'évaluer la dilution lacrimale et de mesurer la teneur en Hm en moins de 10 minutes.