Attenuation of Avian Infectious Bronchitis Virus by Cold-Adaptation

Avian infectious bronchitis virus (IBV) Arkansas-type DPI strain was passaged 10 times in specific-pathogen-free (SPF) chicken embryos incubated at 28 C and 37 C. Virus grown at 28 C acquired cold-adapted (CA) and temperature-sensitive (TS) characteristics based on more-rapid growth at 28 C and a reduced ability to grown at 41 C, respectively, compared with non-cold-adapted (non-CA) virus grown at 37 C. The pathogenicity and immunogenicity were determined for CA and non-CA IBV in 1-day-old SPF chickens following intratracheal inoculation. The percentage of CA IBV-vaccinated chicks exhibiting respiratory disease exceeded 30% on only 1 day postinoculation (PI) (day 5 PI), compared with 8 days (days 2-9 PI) for birds given non-CA IBV. Mortality was 0% for CA IBV-vaccinated chickens and 6% for non-CA virus-vaccinated chickens. Microscopically, both CA and non-CA IBV caused diffuse tracheal deciliation, although mucosal hyperplasia, necrosis, and heterophil infiltration were more severe with non-CA IBV. Virus was reisolated from kidneys of chickens given CA IBV, suggesting the loss of the TS property. The instability of the TS property was confirmed by growth of the reisolated virus at 41 C. Both CA and non-CA viruses induced complete protection against homologous challenge virus infection of the upper respiratory tract. /// La cepa DPI tipo Arkansas del virus de bronquitis infecciosa fue pasada 10 veces en embriones de pollo libres de patógenos específicos incubados a 28 C y 37 C. El virus cultivado a 28 C adquirió características se adaptación al frío y sensibilidad a la temperatura, demostrado por un crecimiento más rápido a la temperatura de 28 C y una capacidad reducida para crecer a 41 C, comparado con el virus no adaptado al frío y cultivado a 37 C. La patogenicidad e inmunogenicidad de los virus de bronquitis infecciosa adaptados y no adaptados al frío fue determinada por la inoculación intratraqueal de pollos de un día de edad libres de patógenos específicos. El porcentaje de pollos vacunados con virus de bronquitis que mostraron enfermedad respiratoria excedió un 30% en sólo un día postinoculación (5o. día postinoculación), comparado con 8 días (2o. a 9o. días postinoculación) en las aves vacunadas con el virus de bronquitis no adaptado al frío. La mortalidad fue del 0% en los pollos vacunados con el virus adaptado al frío y de 6% en los pollos vacunados con el virus no adaptado. Microscópicamente los dos virus mostraron desciliación traqueal difusa,