EFECTO DE CARBOHIDRATOS Y MUTACIONES DE REGULADORES QUE INTERACTÚAN CON EL COMPLEJOCYC8- TUP1 EN PRODUCCIÓN DE METABOLITOS SECUNDARIOS EN Xanthophyllomyces dendrorhous

La levadura basidiomicete Xanthophyllomyces dendrorhous produce astaxantina y otros metabolitos secundarios, que estarían regulados por el complejo correpresor CYC8-TUP1. En esta levadura, al igual que en S. cerevisae se han identificado los genes reguladores SKN7, YAP6, ROX1, HXK2, HOG1 y OPI1, involucrados en varios procesos celulares, los cuales interactuarían con el complejo CYC8-TUP1. Para estudiar la regulación genética de la biosíntesis de metabolitos secundarios de X. dendrorhous, se identificaron, clonaron, analizaron bioinformáticamente y mutaron dichos genes. Para ello, se diseñaron y elaboraron módulos de deleción y se reemplazaron sus ORFs por genes de resistencia a higromicina y zeocina. Se obtuvieron mutantes homocigotos mediante transformación integrativa de la cepa silvestre diploide con los respectivos módulos de resistencia. El complejo correpresor CYC8-TUP1 está implicado en el metabolismo de regulación por glucosa, y como una forma de estudiar la deleción de estos genes en la producción de metabolitos secundarios se estudió el crecimiento de ellos en medio mínimo YNB con glucosa o maltosa al 2%. El análisis del mutante yap6(-/-) mostró un crecimiento lento inicial, respecto la cepa silvestre, en ambos medios, alcanzando posteriormente el mismo nivel crecimiento en la fase estacionaria. Respecto a la producción de metabolitos secundarios como pigmentos, micosporina y ergosterol, estos fueron afectados de distinta forma según la fuente de carbono; para la deleción rox1(-/-) en maltosa la producción de pigmentos fue similar a la cepa silvestre, siendo mayor que en medio con glucosa. Además, en glucosa los mutantes skn7(-/-) y yap6(-/-) mostraron mayor producción de pigmentos.