Kristalle in Minutenschnelle: Sofortige Mikrokristallisation verschiedenster Varianten der CYP102A1‐(P450BM3)‐Hämdomäne

Die Kristallisation der Hämdomäne von CYP102A1 (P450BM3) kann nach Modifizierung eine Herausforderung sein. Dennoch sind solche Kristallstrukturen unentbehrlich für die wirksame strukturbezogene Entwicklung von P450BM3 als Biokatalysator. Es wurde gezeigt, dass das Abietanditerpenderivat N‐Abietoyl‐...

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Bibliographische Detailangaben
Veröffentlicht in:Angewandte Chemie 2020-05, Vol.132 (19), p.7681-7689
Hauptverfasser: Stanfield, Joshua Kyle, Omura, Keita, Matsumoto, Ayaka, Kasai, Chie, Sugimoto, Hiroshi, Yoshitsugu Shiro, Watanabe, Yoshihito, Shoji, Osami
Format: Artikel
Sprache:eng
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Beschreibung
Zusammenfassung:Die Kristallisation der Hämdomäne von CYP102A1 (P450BM3) kann nach Modifizierung eine Herausforderung sein. Dennoch sind solche Kristallstrukturen unentbehrlich für die wirksame strukturbezogene Entwicklung von P450BM3 als Biokatalysator. Es wurde gezeigt, dass das Abietanditerpenderivat N‐Abietoyl‐l‐tryptophan (AbiATrp) ein hervorragender Kristallisationsbeschleuniger ist. Die Nutzung von Kristallen der P450BM3‐Hämdomäne mit AbiATrp als Impfkristalle ermöglichte die rasche Mikrokristallisation bei der naszierende Kristalle innerhalb von Sekunden nach Impfung erschienen. Hierdurch wurde eine Auswahl an Kristallen der P450BM3‐Hämdomäne erhalten, die bisher nicht kristallisierbare Täuschmoleküle, diverse künstliche Metalloporphyrine, welche verschiedenartige Liganden binden, sowie zusätzlich stark getaggte Hämdomänevarianten enthalten (37 zusätzliche Aminosäuren). Manche der Strukturen könnten als Modellverbindungen verschiedener Stadien des katalytischen Zyklus von P450BM3 genutzt werden.
ISSN:0044-8249
1521-3757
DOI:10.1002/ange.201913407