Выделение и очистка индивидуальной тРНКLys из Thermus thermophilus и определение ее минорных оснований

Лизил-тРНК синтетаза вместе с аспартил- и аспарагил- тРНК синтетазами принадлежит к ІІб подкласу и имеет ряд характерных особенностей. Все АРСазы подкласса ІІб имеют N-концевые антикодон-связывающие домены (около 140 аминокислотных остатков), функционируют в виде гомодимера α2 и для каждой АРСазы антикодоновые триплеты являются главными, но недостаточными элементами узнавания. При этом для всех тРНК, гомологичных этим АРСазам, центральным основанием антикодона является уридин, и дискриминация этих антикодонов зависит только от первой буквы антикодона. Возникают закономерные вопросы относительно структурных основ и механизмов дискриминации этих антикодонов структурно близкими связывающими доменами АРСаз и возможной роли минорных оснований в этих процессах. Приведены разработанные методические подходы к получению высокоочищенной тРНК