Stemphylium vesicarium에 의한 양파 잎마름병 생물검정법 개발

Stemphylium vesicarium에 의한 잎마름병은 Allium 속에서 발생하는 중요한 곰팡이병으로 , 양파의 품질을 저하시키고 생산량을 감소하는 등 큰 피해를 주고 있다 . 본 연구는 양파 잎마름병에 대한 효과적인 유묘 검정법 확립 에 앞서 , 접종원인 S. vesicarium의 포자 대량생산과 양파 잎마름병 발생 실험 최적 조건을 확립하기 위한 것이다 . 상 처 및 광 조사 유무 그리고 배지 종류에 따른 S. vesicarium의 포자 생산량을 조사한 결과 , S. vesicarium 균주의 포자 형성을 위해서는 rice bran agar 배지에 접종하고 25oC에서 배양한 후, 멸균한 붓으로 균총을 긁어내고 항온항습실 (온도 25oC, 상대습도 80%)에서 하루 12시간씩 48시간 동안 광을 조사하는 것이 효과적이었다 . 또한 양파의 잎마름 병 발생 조건 확립을 위해 발육 시기 , 접종 농도 , 포자현탁액 내 영양원 그리고 접종 후 배양 시간 등은 다음과 같은 실험과정이 적합하였다 . 먼저 , 원예용상토에 파종 후 약 100일이 지난 4엽기 양파에 비흡수성 재질로 구성된 솜으로 문지른 후에 1/2 potato dextrose broth (1/2 PDB) 용액내 포자현탁액 (1.0 × 10⁵ spores/mL)을 분무하여 접종한다 . 그 다음 , 대상 식물체를 20oC 습실상에 48시간 동안 처리하고 , 항온항습실 (온도 25oC, 상대습도 80%)로 옮겨서 하루에 12시간씩 광을 조사한다 . 마지막으로 접종 7일 후에 잎에 발생한 잎마름병의 병반면적율 (%)을 산출한다 . 이와 같이 확립한 양파 잎마름병 실험은 약제의 in vivo 살균 활성 검정 및 병저항성 검정에 유용하게 사용될 것으로 생각된다 . Leaf blight caused by Stemphylium vesicarium has become an important fungal disease of Allium genus, which leads to decrease quality and seed production of onion. To establish in vivo bioassay methods on leaf blight of onion (A. cepa) by S. vesicarium, we conducted to determine optimum conditions for spore production of S. vesicarium and development of leaf blight on onion plants by the fungus. From the results of spore production of S. vesicarium according to wound, light, and medium, we suggest a method to produce spores of S. vesicarium that the fungus are grown on rice bran agar medium at 25oC. And fungal masses are scratched with a brush and then the plate is incubated for 48 hours in a growth chamber at 25oC and 80% RH under 12-hour light per day. In addition, development of leaf blight on onion plants caused by S. vesicarium according to growth stage of plants, inoculum concentration, nutrient source added in spore suspension, and incubation conditions was tested. To efficiently develop leaf blight on onion seedlings, seeds have to be sow on horticultural soil and cultivate up to four-leaf stage in a greenhouse (25 ± 5oC). Seedlings are rubbed with bleached, nonabsorbent cotton and inoculated with spore suspension (1.0 × 10⁵ spores/mL) made of 1/2 potato dextrose broth, by spray method. The inoculated plants are incubated in a dew chamber at 20oC for 48 hours, and then the infected seedlings are cultured in a growth chamber at 25oC and 80% RH with 12-hour light per day. Infected leaf area (%) is measured 7 days after inoculation. The established method is considered to be useful for in vivo antifungal act