SV40 large T antigen 을 이용한 각막내피세포의 증식유도

목적 : 각막내피세포는 증식을 하지 않는 특징이 있고,연령이 증가함에 따라 그 수가 감소하는 특징이 있다. 따라서, 각막내피 세포의 수를 유지하기 위한 많은 연구가 이루어져왔다.본 연구에서는 Simian Virus(SV)40 large T 항원을 이용하여 증식을 정지시킨 각막내피세포의 증식을 유도할 수 있는지 알아보고자 하였다. 대상과 방법 : SV40 large T 항원을 배양각막내피세포에 주입시킨 뒤 그것이 실제로 증식을 증가시켰는지 알아보기 위하여 Ki-67 antibody와 Bromodeoxy Uridine(BrdU)에 대한 염색을 실시하였다. 결과 : SV40 large T 항원을 배양각막내피세포로 주입시킴으로써 BrdU의 incorporation과 Ki-67의 염색이 증가하였음을 알 수 있었다. 결론 : SV40 large T 항원은 세포내에서 D N A합성을 유도하여 일시적으로 세포의 증식을 현저하게 증가시킨다는 것을 확인하였다. Purpose : To determine whether the delivery of the SV40 large T-antigen is a feasible method for transiently inducing proliferation of corneal endothelial cells, we delivered liposome-protein complex into bovine corneal endothelial cells(BCEC). Method : SV40 large T-antigen protein was introduced into BCEC and positive cells were identified by immunohistochemistry. Quiescent BCECs were double-labeled using BrdU as a measure of de novo DNA synthesis and the Ki-67 was detected by standard immunohistochemical methods. Result : The treatment of quiescent BCECs with large T antigen caused an increase in BrdU incorporation and Ki-67 expression. It was tested by time-course study. Conclusion : This finding suggests that liposome-mediated delivery of transforming proteins could be a method to transiently induce corneal endothelial cell proliferation. J Korean Ophthalmol Soc 42(9):1331-1335, 2001