ヒト歯髄培養細胞におけるlipopolysaccharideによるkallikrein-related peptidase 8産生と炎症反応

目的：Kallikrein-kininカスケードは炎症時における血管透過性亢進や発痛に関与するが，組織カリクレインとも呼ばれるkallikrein-related peptidase（KLK）は，そのカスケードを担うだけでなく，生体内でさまざまな機能を示す．また，グラム陰性菌の外膜成分であるlipopolysaccharide（LPS）は起炎物質の一つとして知られており，歯髄でもまた炎症の誘発・進展に作用する．著者らは，歯髄でLPSがKLK8の発現を促進し，さらにKLK8が炎症促進的に作用するという仮定の下，ヒト歯髄培養細胞を用いて基礎的研究を行った． 材料と方法：抜去歯よりアウトグロースした細胞をヒト歯髄培養細胞とし，10% FCS添加α-MEMにて培養した．培養上清中にLPSを添加後のKLK8発現量の変化，もしくはKLK8添加後のCOX-2発現について，RT-PCR法，Western blot法にて検索した．細胞内の遊離カルシウムイオン濃度の測定は，蛍光カルシウムプローブFura-2を用いた蛍光連続測定にて行い，また培養上清中に放出されたPGE2量をenzyme immunoassay kitにて検討した． 成績：ヒト歯髄培養細胞において，LPSは時間依存的，濃度依存的にKLK8 mRNAとタンパク質の発現を促進した．LPSによるKLK8タンパク質発現はERK1/2，P38 MAPK阻害剤で抑制された．また，KLK8はPAR-1受容体非依存的にCOX-2タンパク質発現および培養上清中PGE2産生を促進し，その効果はtyrosine kinase阻害剤で抑制された． 結論：LPSはKLK8の産生に関与し，kallikrein-kininカスケードに影響を及ぼすことで歯髄炎の進行に関わることが示唆された．またKLK8は歯髄でkininogen活性化だけでなくPAR-1非依存的，tyrosine kinase依存的にCOX-2の産生，PGE2の分泌を促進する可能性が示唆された．