2-オキソグルタル酸脱水素酵素複合体の成分酵素への迅速分離法(p.33～40)

2-オキソグルタル酸脱水素酵素複合体の成分酵素への迅速分離法(p.33～40)

ブタ心筋の2-オキソグルタル酸脱水素酵素複合体(OGDC)は3種類の成分酵素(OGDH, LST, Fp)が分子集合した多酵素複合体である. すでに各成分酵素への分離方法が考案されているが, 2段階の変性剤処理を比較的長時間行なうため, タンパク質の変性が起こり, 成分酵素の収率は著しく悪かった. 今回, 著者らはOGDCの成分酵素への迅速な分離方法を開発した. すなわち, TSK-GEL G4000SWGカラムを用いて0.7Mグアニジン塩酸存在下で10℃にてHPLCを行ない, LST画分とOGDH, Fp混合画分に分離し, 前者は0.5%デオキシコール酸処理を行なってさらに純化し, 後者はリ...

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Bibliographische Detailangaben
Veröffentlicht in:日本栄養・食糧学会誌 1986, Vol.39 (3), p.239-239
Hauptverfasser: 森安眞津子, 小池吉子, 浦田芳重, 辻明彦, 小池正彦
Format: Artikel
Sprache:jpn
Online-Zugang:Volltext
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Beschreibung
Zusammenfassung:ブタ心筋の2-オキソグルタル酸脱水素酵素複合体(OGDC)は3種類の成分酵素(OGDH, LST, Fp)が分子集合した多酵素複合体である. すでに各成分酵素への分離方法が考案されているが, 2段階の変性剤処理を比較的長時間行なうため, タンパク質の変性が起こり, 成分酵素の収率は著しく悪かった. 今回, 著者らはOGDCの成分酵素への迅速な分離方法を開発した. すなわち, TSK-GEL G4000SWGカラムを用いて0.7Mグアニジン塩酸存在下で10℃にてHPLCを行ない, LST画分とOGDH, Fp混合画分に分離し, 前者は0.5%デオキシコール酸処理を行なってさらに純化し, 後者はリン酸カルシウムゲル-セルロースカラムクロマトでOGDHとFpに分離した. 本方法により, 高い比活性を示し, 電気泳動上も均一である成分酵素を, かなり高い回収率にて短時間のうちに分離・精製することができた.
ISSN:0287-3516