IL-1受容体を介したiNOS遺伝子発現におけるPKCとNF-κBの核内移行の関与

インターロイキン1(IL-1)は種々の難治性炎症性疾患の発症・維持に深く関与するとされ, 広汎な生理活性作用を有する炎症性サイトカインの一つである. 我々は以前血管平滑筋細胞(VSMC)において誘導型NO合成酵素(iNOS)が発現することを見出したが, このiNOSや誘導型シクロオキシゲナーゼ(COX-II)の発現はIL-1によって引き起こされることが, 現在広く知られている. 本研究ではiNOS遺伝子発現に重要とされる転写因子NF-κBの活性化(核内移行)とPKCの関わりについて検討を加えたので報告したい. PKCαに対するAntisense Oligodeoxynucleotide(AS-PKCα)をVSMCにtransfectionし, PKCαをknockdownした状態で, IL-1β刺激によるiNOS遺伝子発現およびNF-κBの活性化を観察した. PKCαのknockdownはiNOS遺伝子発現をほぼ50%に抑制し, PKC阻害薬であるRo 31-8220を用いたときiNOS遺伝子 遺伝子発現は完全に抑制された. これによりiNOS遺伝子発現はPKC依存的であり, PKCαがその活性の半分を担っていることが示唆された. 一方, NF-κBの活性化はPKCαknockdown及びRo31-8220処置により何ら影響を受けなかった. これによりIL-1β刺激によるNF-κBの核内移行はPKC非依存的であることが示唆された. また, NF-κBは通常, 二量体を形成していることが知られているのでEMSAにて抗体によるsupershiftを検討したところ, VSMCにおいてはp65/p50ヘテロダイマーであることが明らかとなった. これらのことにより, VSMCにおいては, IL-1β刺激によるNF-κBの核内移行が観察されたが, これは, iNOS遺伝子発現とは異なり, PKCαおよびそれ以外のPKC isozymesによる調節を受けない, PKC非依存的な経路を介している可能性が示唆された.