抑制性受容体の機構；Gタンパク質

抑制性受容体へのリガンドの結合により, Giに結合するGDPがGTPに置換され, GiはGiαとβγサブユニットに解離する. このβγがアデニル酸シクラーゼを抑制することは, 私共, 及び堅田ら, などにより報告された. 本演題では, 精製ラット脳アデニル酸シクラーゼ(AC)におけるGタンパク質βγサブユニットによる抑制機構について報告する. 精製したβγサブユニットは精製AC活性を最高85%抑制した(IC50；0.7nMβγ). βγにより抑制された状態のAC(実測70%抑制)を密度勾配遠心により分離し, 酵素とβγサブユニットのcomplexを得た. このcomplexは, immunoblotting及び酵素活性の抑制作用による定量により, AC1モルに対しβγサブユニットが1.8－2.0モル結合していた. しかし, 2モルのβγのうち1分子の結合が抑制作用の発現に必須であり, 2分子めの結合の役割は不明である. 抑制作用はGsαやカルモデュリンには依存していなかった. しかし, 精製したACには抗Gsα抗体と反応するタンパク分子がAC1分子当り0.06－0.08モル結合していた. このGsαはβγによるACの抑制には関与していない結果を得た. βγによる抑制はこのcomplexの希釈により解除され, 再度添加されたβγにより酵素活性は約15%にまで再び抑制された. ACとβγが可逆的にcomplexを形成することにより, βγはACを可逆的に直接抑制することが強く示唆された. (本研究はJJP 69, 239～250(1995)に概ね報告された)