心機能調節におけるカルモデュリン依存性リン酸化反応の役割

心機能におけるCa／カルモデュリン依存性リン酸化反応の関与を調べるために, 我々は, 新しく創製したカルモデュリン依存性プロテインキナーゼII（キナーゼII）阻害剤KN－62（JBC, 265,4315,1990）の心筋ホスホランバンのリン酸化に対する作用を検討した. KN－62は, カルモデュリンに競合的にキナーゼIIを阻害し, そのKi値は0.3μMであった. KN－62は, 心筋SR中ホスホランバンのcAMP依存性リン酸化には影響することなく, カルモデュリン依存性リン酸化を選択的に阻害した. そこで, カルモデュリン依存性キナーゼをイヌ心筋より精製し性質を調べると, ラット脳のキナーゼII抗体で認識され（分子量55kDa）, Ca／カルモデュリン存在下でのみイヌ心筋SRから高度に精製したホスホランバンをリン酸化したことから, 心筋タイプのキナーゼIIであることが判明した. KN－62は, このリン酸化反応を用量依存性に阻害し, また, カルモデュリン依存性リン酸化により活性化された心筋SRのCa－Mg ATPase活性を有意に阻害した. 以上より, 心筋SRの機能の調節にキナーゼIIが関与していることが示唆された. また, KN－62は, キナーゼIIによるリン酸化反応の生物学的意義を解明するための薬理学的toolとして有用であると思われた.