Na^+ ポンプにおけるウアバイン非感受性ATPase活性

強心配糖体（Ouabain）の受容体とされているNa^+ ,K^+ -ATPaseとouabainの相互作用を解析するため, 反応中の分子構造変化が検出できる蛍光性SH試薬N-「p-（2-bonzimidazolyl）phenyl」male－imide（BIPM）で修飾したブタ腎のNa^+ ,K^+ －ATPaseをトリプシン処理（T）し, 種々の反応に及ぼすouabainの効果を検討した. Mg^2+ ,Na^+ ,K^+ 共存下でのATPase活性は, コントロール（C）標品に比べ, T標品では約20%に減少したが. リン散化酵素（EP）量, ouabain結合量はそれぞれ約70,90%残存していた. E_1 P, E_2 P, 及びouab.E_2 P形成に伴うBIPMの蛍光強度変化, 並びに, E_1 P及びouaB. E_2 P形成に伴う光散乱強度変化は, C標品と同様にT標品でも検出された. 部分反応であるMg^2+ ,Na^+ 存在下でのATPase活性は, ouabainによりC標品では90%以上阻害されるのに対し, T標品では約40%しか阻害されず, ouabain非感受性となった. さらにouab. E_2 Pの脱リン酸化の速度と, その時遊離される無機リン量（Pi）を同時測定し, △Pi/△ouab.E_2 ,Pを計算すると, C,T標品でそれぞれ約20,160となった. オリゴマイシンは, T標品のouabain非感受性ATPase活性にほとんど影響を与えなかった. 又, SDSゲル電気泳動の結果, 活性中心を含むペプチドは. トリプシン分解により, 数本の, 分子量の小さいペプチドに切断されていることが示された. 以上の結果から, Na^+ 存在下でのATP加水分解は, 大郎分ouab. E_2 Pを経由しない経路（E_2 P形成より前のステップ）で生じ, トリプシン分解によりその活性が数倍増大したことが示唆された.