モルモット肉趾由来培養線維芽細胞のプロテオデルマタン硫酸について

プロテオデルマタン硫酸(PDS)の代謝にアプローチする実験系として, モルモット足蹠皮膚線維芽細胞は, 〔^^3 H〕glucosamineをトレーサーとして用いた場合, radioactivityがDSに取り込まれることにより有用と考え, 今回この系が合成するPDSについて検討した. また, 培養メディウムからPDSが抗ウシPDS抗体により回収されるかを検討した. 〔方法〕モルモット足蹠線維芽細胞を, 10%胎児ウシ血清, Dulbeccos modified Eagle medium(DMEM)にて継代培養しPDSをラベルするため血清free DMEMに〔^^3 H〕glucosamine存在下と〔^^3 H〕glucosamine・〔^^35 S〕methionine存在下で24時間incubateした. それぞれのメディウム中のPDSを回収するため抗ウシPDS抗体を加え免疫複合体として回収し, これについて分析した. また, 上清のPDSの性状を調べるためCPC複合体として回収し, DE32イオン交換クロマトグラフィー, CsCl密度勾配遠心法, Sepharose CL-4Bゲルクロマトグラフィーを行い精製した.