Carboplatin과 온열요법이 retinoblastoma cell line의 세포사에 미치는 영향에 관한 연구

목적: 주변산도에따라 온열요법 및 Carboplatin에 의해 일어나는 망막모세포종 세포주의 apoptosis를 관찰하고자 하였다. 대상과 방법: Y79와 WERI 망막모세포종 세포를 대상으로 하여 중성 및 산성 환경에서 Carboplatin과 온열요법에 의해 일어나는 apoptosis를 DNA 전기영동법으로 관찰하고 flow cytometry를 이용하여 정량 분석하였다. 또한 apoptosis 유도와 관련된 분자생물학적 기전을 규명하기 위해 p53, p21의 발현변화 및 PARP분절을 관찰하였다. 결과: WERI 세포들은 pH 6.6 환경에서 온열요법후 세포사가 pH 7.5환경에서보다 컸다. 동일한 산도의 환경에서의 온열요법의 효과는 Y79 세포들에서 WERI 세포들보다 컸다. 50μM Carboplatin이 42.5℃ 온열치료보다 세포사에 더 효과적이었는데 pH 6.6 환경에서는 반대로 42.5℃ 온열치료가 50 μM Carboplatin보다 더 효과적이었다. 또 Carboplatin과 42.5℃ 온열치료를 병행하였을 때 이들을 단독으로 사용했을 때 보다 세포를 죽이는데 현저히 효과적이었다. 결론: 온열치료법과 Carboplatin의 병합처치가 온열치료법 및 Carboplatin의 단독인 경우보다 세포밖의 환경에 관계없이 치료효과가 현저히 증가함을 알 수 있었다. 산성화된 환경은 Carboplatin 사용시 세포사를 증가시키지않으나 온열요법시는 세포사를 증가시킴을 알수있었다. Purpose: The effect of environmental acidity on the induction of apoptosis by heat and carboplation alone or combined was investigated. Methods: Human retinoblastoma Y79 and WERI cells were treated with hyperthermia at 42.5℃ for 1 hr and 25∼50μM carboplatin alone or combined with hyperthermia in pH 6.6 medium and the resultant apoptosis was assessed based on the flow cytometric determiantion of DNA content, DNA fragmentation, and PARP cleavage. The cell viability was alone determined with trypan blue exculsion method. Expressions of p53 and p21 were examined using Western blot analysis. Result: The degree of apoptosis after heating in pH 6.6 medium was greater than in pH 7.5 medium in WERI cells. When heated in the same pH medium, more apoptosis occurred in the WERI cells than in the Y79 cells. The decline in cell viability caused by hyperthermia was greater than that by 50 μM of carboplatin in pH 6.6 medium but not in pH 7.5 medium. Conclusions: The cell death caused by the combianation of carboplatin and hypethermia was greater than that by either treatment alone regardless of the environmental pH. It was concluded that an acidic environment enhances not carboplatin-induced cell death but heat-indeced cell death.