Species differentiation of slugs (Mollusca, Pulmonata) by using DNA-fingerprinting techniques (SSR-a PCR; RAPD) / Artunterscheidung von Nacktschnecken (Mollusca, Pulmonata) durch genetische Fingerabdrücke (SSR-a PCR; RAPD)

The differentiation of slug species within or between genera using morphological features can be difficult and sometimes inaccurate. So far the methods of dissecting specimen and using the reproductive tract as a characteristic (kerney et al. 1983) as well as protein electrophoresis (Backeljau et al. 1996) have been described as feasible approaches to determine slug species. In this contribution the utility of DNA-fingerprinting using either simple sequence repeat anchored polymerase chain reaction (SSR-a PCR) or random amplified polymorphic DNA (RAPD) is portrayed. DNA samples for both methods were isolated from fresh somatic slug tissue and several oligonucleotide primers have been used to generate DNA fingerprints. PCR products were resolved by agarose gel electrophoresis and visualized by ultraviolet transillumination. In this paper it is shown that both methods are suitable molecular tools to distinguish the slug species Arion distinctus, Avion fasciatus and Derocevas reticulatum on the species and the genera level. Die Unterscheidung von Nacktschnecken innerhalb bzw. zwischen Arten anhand morphologischer Merkmale ist schwierig und zuweilen ungenau. Bisher wurden Methoden veröffentlicht, die entweder die Sektion der Tiere und Artunterscheidung anhand der Reproduktionsorgane (Kerney et al. 1983) oder mittels Proteinelektrophorese (Backeljau et al. 1996) beschrieben. In diesem Beitrag wird die Verwendung von genetischen Fingerabdrücken mit den Techniken Simple Sequence Repeat anchored Polymerase Chain Reaction (SSR-a PCR) oder Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) beschrieben. Für beide Methoden wurden DNA-Proben von frischem somatischem Gewebe isoliert und verschiedene Primer wurden untersucht, um die genetischen Fingerabdrücke zu erstellen. Die PCR-Produkte wurden anschließend auf einem Agarosegel elektrophoretisch aufgetrennt und im ultravioletten Durchlicht visualisiert. Im vorliegenden Artikel wird gezeigt, daß beide Methoden geeignet sind, die Arten Avion distinctus, Avion fasciatus and Devocevas veticuUtum auf Ebene der Gattung sowie der Art zu unterscheiden.