利用PCR-RFLP技術鑑定三種白輪盾介殼蟲 (Aulacaspis spp.) (同翅目：盾蚧科) 及其在檢疫上之應用

介殼蟲蟲體微小且外形相似，幼體時期特徵不明顯，在鑑定上不易確定，造成在檢疫工作上困難重重。本研究主要利用基因組核酸標誌 (genomic DNA markers) 建立分子診斷技術，以鑑別三種白輪盾蚧屬 (Aulacaspis spp.) 之介殼蟲，分別為蘇鐵白輪盾蚧 (A. yasumatsui Takagi)、月橘白輪盾蚧 (A. murrayae Takahashi) 和樟白輪盾蚧 (A. yabunikkei Kuwana)。利用聚合[艹雨]連鎖反應－限制[艹雨]片段長度多態型 (polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism, PCR-RFLP) 技術，探討核糖體形成基因 (ribosomal DNA, rDNA)，作為鑑別三種介殼蟲的可行性。我們使用單隻標本分別萃取 DNA 後，利用 PCR 引子對 (Amur18S-3 和 ITS6) 增幅 rDNA 之 部分的 18S、ITS1 及部分的 5.8S 區域，蘇鐵白輪盾蚧和月橘白輪盾蚧均產生約 500 bp 的 DNA 片段；樟白輪盾蚧則產生約 450 bp 的 DNA 片段。利用多種核酸內切[艹雨]進行 DNA 片段切割，結果以 TaqI、MspI、CfoI 和 HaeIII 核酸內切[艹雨]，所得圖譜的種類特異性較高，可容易地區別三種白輪盾蚧