IgE epitopes are within the hydrophobic domain of sesame oleosin Ses i 4

Aim of the studyOleosins are allergens implicated in severe anaphylactic reactions after sesame, peanut or hazelnut consumption. However, identifying oleosin allergenic epitopes is hindered by their hydrophobic properties that do not allow analysis in an aqueous solution. Therefore, the present study focused on determining IgE-binding domains of sesame oleosin Ses i 4 using immunoblotting.Patients and methodsWe relied on sera from ten patients with clinically established allergy to sesame. Immunoblotting coupled to Hydrophobic Cluster Analysis (HCA) approach using a series of recombinant full-length and truncated Ses i 4 variants enabled detection of IgE reactivity domains.Results and conclusionThe data showed that IgE-binding sequences were located in the hydrophobic domain of the Ses i 4. The three IgE-binding segments were in proximity but on the flanks of the central-most hydrophobic segment. Further, their amino acid sequences are highly conserved in Ses i 4-homologs from different allergenic sources. Therefore, unlike most clinical immunoassays, Western blotting may be helpful for in vitro detection of oleosin IgE reactivity. But de l’étudeLes oléosines sont des allergènes impliqués dans des réactions anaphylactiques sévères consécutives à l’ingestion de sésame, d’arachide ou de noisette. Pourtant, l’identification des épitopes de ces protéines est compliquée par leur caractère, hautement hydrophobe, qui ne permet pas leur étude en solution aqueuse. C’est pourquoi ce travail se focalise sur la mise en évidence des épitopes IgE de l’oléosine de sésame Ses i 4 par immunoblot.Patients et méthodesNous avons utilisé les sera de 10 patients dont l’allergie au sésame a été démontrée cliniquement. Des immunoblots couplés à une analyse Hydrophobic Cluster Analysis (HCA), d’une série de protéines recombinantes dérivées de Ses i 4, nous ont permis d’identifier les domaines IgE réactifs.Résultats et conclusionLes résultats obtenus ont montré que les séquences IgE-réactives étaient situées dans le domaine hydrophobe de Ses i 4. Les trois épitopes IgE-réactifs sont situés à proximité immédiate de la portion la plus hydrophobe de ce domaine, au niveau de ses extrémités. Leurs séquences sont très conservées dans les oléosines homologues de Ses i 4 d’autres sources allergéniques. Ainsi, et contrairement à la plupart des tests immunologiques classiques, le Western blot peut être utile pour mettre en évidence l’IgE réactivité des oléosines in vitro.