Les lymphocytes B autoréactifs sont caractérisés par un phénotype mémoire chez les patients atteints de syndrome de Sjögren primitif et de vascularite associée aux ANCA

Les lymphocytes B (LB) sont au centre des mécanismes des maladies auto-immunes. Ces maladies sont définies par une rupture de la tolérance du soi du système immunitaire chez les patients et la production d’auto-anticorps contre des composants de son propre organisme. Des auto-anticorps spécifiques sont détectables chez tous les sujets sains. Néanmoins, ceci n’engendre pas le développement des maladies auto-immunes, on parle d’auto-immunité naturelle. Les auto-antigènes et auto-anticorps ont été bien décrits dans les maladies auto-immunes, cependant très peu d’études existent sur les caractéristiques des cellules productrices de ces auto-anticorps : les lymphocytes B (LB) auto-réactifs. L’objectif de ce travail est d’étudier ces LB auto-réactifs dans deux maladies auto-immunes différentes : la vascularite associée aux ANCA (VAA) et le Syndrome de Sjögren (SS) comparativement à des sujets sains afin de mieux comprendre leur rôle dans l’auto-immunité naturelle et l’auto-immunité pathologique. Nous avons mis au point une méthode de reconnaissance de ces LB auto-réactifs circulants par la spécificité de leur récepteur à l’antigène (BCR) envers la protéinase 3 (PR3) et la SSA, les deux auto-antigènes clés des deux MAI. L’étude des marqueurs de surface par cytométrie en flux a permis de définir le stade de maturation des LBs. Nous avons également mesuré leur capacité à sécréter des immunoglobulines de différents isotypes par ELISPOT, et leur réponse à différents stimuli. Une analyse du répertoire des immunoglobulines ainsi que le profil d’expression génique à l’échelle unicellulaire sur des LB auto-réactifs, comparativement chez des sujets sains et des malades, a été effectué pour mieux comprendre la nature de la diversité résidente au sein des LB auto réactifs. Nos résultats montrent que ces LB auto réactifs représentent 1 à 4 % des LB circulants chez les patients et les sujets sains. Chez les patients atteint de Syndrome de Sjögren, nous avons une augmentation de la fréquence des LB auto-réactifs pathogènes spécifiques de la SSA par rapport à la fréquence des LB auto réactifs naturel. Nos résultats montrent que ces cellules se répartissent différemment parmi les sous-populations de LB ainsi ils ont un stade de maturation plus avancé par rapport aux sujets sains (5 à 9 % sont des LB mémoires producteurs d’IgG). Sur un plan fonctionnel, les LB auto-réactifs naturels sont quant à eux capables de sécréter des auto-anticorps d’isotype IgM mais pas IgG. Une analyse t