Un enfoque racional de la relación estructura-función con el uso de isoformas quiméricas de sticholysinas proporciona nuevas consideraciones sobre sus diferencias funcionales

Sticholysinas I y II son dos isoformas de proteínas formadoras de poros de la anemona de mar Stichodactyla helianthus caracterizadas exhaustivamente. Sticholysinasí y II tienen 176 y 175 residuos de aminoácidos respectivamente y solo 12 diferencias aminoacídicas. En consecuencia, tienen un 99% de similitud, un 93% de identidad secuencial, y estructuras tridimensionales muy similares. Sin embargo, la sticholysina II hemolíticamente más activa que la sticholysina I en eritrocitos humanos y de cobayos. No se conocen las razones de estas diferencias funcionales, pero es interesante que la mayoría de los cambios aminoacídicos se encuentran en regiones funcionales como: el segmento N-terminal, los lazos asociados con el sitio de unión a la membrana y los sitios de interacción proteína-proteína. Para profundizar en las diferencias de actividad hemolítica entre las sticholysinas I y II, diseñamos y obtuvimos por via recombinante en Escherichia coli tres proteínas quiméricas que intercambian diferentes segmentos de ambas isoformas. El análisis de la actividad hemolítica de estas proteínas quiméricas y su modelación por homologia proporciono nuevas evidencias sobre la actividad formadora de poros de las actinoporinas, así como sobre los residuos aminoacídicos que pudieran estar implicados en la diferencia funcional entre las sticholysinas I y II, en la interacción de estas proteínas con las membranas o en el proceso de oligomerización.