PCR-based identification of Neospora caninum in the umbilical cord of a newborn calf in Brazil/Identificacao de Neospora caninum por PCR em cordao umbilical de bezerros recem nascido no Brasil

This study was conducted at a beef cattle breeding farm in the far southern region of Brazil. The birth of a calf with unilateral corneal opacity was immediately reported to the Laboratory of Parasitology, in the Universidade Federal de Pelotas, Rio Grande do Sul, Brazil; blood was collected from the cow and calf before colostrum intake. The umbilical cords from this calf and from six other healthy animals were collected. Serological examination, utilizing an indirect fluorescent antibody test, was done using a cut-off point of 1:100. Polymerase chain reaction (PCR) was also performed using the umbilical cord samples. Serological tests showed that the calfwas positive for Neospora caninum at birth, with a titer of 1:1600; a titer of 1:3200 was reported in the dam. PCR, using umbilical cord tissue from the affected animal, was positive for the presence of this parasite, and the molecular identity of the amplified product was confirmed by sequencing. Therefore, the detection of N. caninum DNA in the umbilical cord represents a novel alternative test for the diagnosis of this parasitic infection in newborn calves that are clinically suspected to have neosporosis. Key words: Neospora caninum, calves, umbilical cord, bovine. O estudo foi realizado em uma fazenda de criacao de gado de corte na regiao do extremo sul do Brasil. O nascimento de um bezerro com opacidade unilateral da cornea foi imediatamente relatado ao Laboratorio de Parasitologia da Universidade Federal de Pelotas (RS) e coletou-se sangue da vaca e do bezerro antes da ingestao do colostro. Foram coletados sangue e cordao umbilical do bezerro com opacidade na cornea bem como de outros seis bezerros aparentemente saudaveis antes da ingestao de colostro. Foram realizados exames sorologicos utilizando o teste indireto de anticorpos fluorescentes (IFAT) com ponto de corte de 1: 100 e reacao em cadeia da polimerase (PCR). O resultado dos exames sorologicos mostraram que o bezerro foi positivo para N. caninum ao nascer com titulacao de 1:1600 e o de sua mae foi de 1:3200 na IFAT A PCR do cordao umbilical foi positiva para o agente no animal com opacidade cornea unilateral e a identidade molecular do produto amplificado foi confirmada por sequenciamento. A deteccao de DNA de N. caninum no cordao umbilical e uma nova alternativa para o diagnostico deste agente em bezerros recem-nascidos com suspeita clinica de neosporose. Palavras-chave: Neospora caninum, bezerros, cordao umbelical, bovinos.