Acquisition and transmission of grapevine [Vitis vinifera] virus A by the mealyburg Pseudococcus longispinus

Transmission of grapevine virus A (GVA) by the pseudococcus mealybug Pseudococcus longispinus was studied. Phases of the transmission process (acquisition access time, retention and inoculation access time) were checked by bioassay using Nicotiana clevelandii and RT-PCR. Virus was acquired either from infected N. clevelandii or from a purified preparation through a stretched parafilm membrane. Evidence was obtained that P. longispinus instars transmit GVA in as little as 15 min when feeding on N. clevelandii or 12 h when feeding on purified virus preparations through a membrane; they retained the virus for up to 48 h when fasting, but no longer than 15 h when allowed to feed on herbaceous hosts following serial transfers; they were able to transmit GVA to healthy plants with no latent period, after a 30 min feeding (the shortest inoculation access time tested). A preliminary survey of populations of different mealyburg species collected in the vineyards of different Mediterranean countries showed that 77% contained GVA and 33% contained grapevine leafroll-associated virus 3 (GLRaV-3). Many samples, including a population of the coccid mealyburg Ceroplastes rusci from Tunisia, contained both viruses E' stato effettuato uno studio sulla trasmissione del virus A della vite (GVA) con la cocciniglia pseudoccide Pseudococcus longispinus. Le varie fasi del processo di trasmissione sono state controllate sia con biosaggi su Nicotiana clevelandii, che con amplificazione genica (RT-PCR). L'acquisizione del virus e' avvenuta o da piante infette di N. clevelandii o attraverso una membrana di parafilm stesa su una microcamera contenente virus purificato. Si e' dimostrato che le neanidi di P. longispinus trasmettono GVA in maniera semipersistente in quanto: (a) acquisiscono il virus con suzioni di 15 min da ospiti erbacei o di 12 h attraverso membrana; (b) ritengono il virus per 48 h quando sono tenute a digiuno dopo l'acquisizione ma per non piu' di 15 h se vengono trasferite serialmente a ospiti sani su cui si alimentano; (c) sono in grado di inoculare il virus senza periodo di latenza entro 30 min dal contatto con l'ospite. Un'indagine preliminare su popolazioni di cocciniglie di specie diverse raccolte in vigneti di differenti Paesi mediterranei ha dimostrato che il 77% dei campioni contenevano GVA e il 33% il closterovirus 3 associato all'accartocciamento fogliare della vite (GLRaV-3). Molti dei campioni esaminati contenevano entrambi i virus, inclusa una popolazio