Methodology for the disinfection and germination of spores and fragments of roots inoculated with Glomus sp. (GEV02) for use under in vitro conditions

La desinfección superficial y la germinación de los propágulos, empleados en inoculantes basados en hongos formadores de micorrizas arbusculares (HFMA), son un requisito de suma importancia para el exitoso establecimiento de la simbiosis bajo condiciones in vitro. El presente trabajo evaluó un protocolo para establecer un método de desinfección y germinación de esporas y fragmentos de raíces con vesículas del HFMA, Glomus sp. (GEV02) en condiciones in vitro. Se realizó la desinfección de esporas de Glomus sp. (GEV02) utilizando una combinación de varios agentes desinfectantes, a partir del uso de cloramina T, hipoclorito de calcio, y de antibióticos. Para los fragmentos de raíces micorrizados como complemento a la utilización de los agentes desinfectantes mencionados anteriormente se aplicó un tratamiento de ultrasonido antes de realizar el proceso de desinfección. Adicionalmente, se empleó un método de germinación de esporas y fragmentos de raíces micorrizados de Glomus sp. (GEV02), utilizando diferentes concentraciones de flavonoide 3,5,7,3’,4’-pentahidroxi flavona. Los resultados reflejaron el efecto positivo de los desinfectantes hipoclorito de calcio (1%), cloramina T (2%) + 2 gotas de tween 20, seguido de una solución antibiótica que contenía 200 mg de estreptomicina sulfatada y 100 mg de gentamicina sulfatada sobre los porcentajes de contaminación de los propágulos infectivos, así como el empleo del flavonoide 3,5,7,3’,4’-pentahidroxi flavona (5 μM) durante la germinación. Este estudio permitió contar con una nueva metodología que garantizó la germinación rápida y exitosa de las esporas y fragmentos de raíces con vesículas del HFMA, Glomus sp. (GEV02) en ausencia de contaminación. Palabras clave: hongo formador de micorriza arbuscular, 3,5,7,3’,4’-pentahidroxi flavona, Glomus sp. (GEV02), desinfección, germinación, flavonoide.Micorrizas; hongo formador de micorrizas Surface disinfection and germination of propagules, used in inoculants based on arbuscular mycorrhizal fungi (AMF), are a requirement of utmost importance for the successful establishment of symbiosis under in vitro conditions. This study assessed a protocol to establish a method of disinfection and germination of spores and root fragments with vesicles of the AMF Glomus sp. (GEV02) under in vitro conditions. The Glomus sp. (GEV02) spore disinfection was carried out using a combination of several disinfecting agents: chloramine T, hypochlorite, calcium, and antibiotics. For mycorrhized r