Papel de la Endotelina-1 en la activación de los neutrofilos humanos relación con el sistema óxido nítrico-guanosin monofosfato cíclico

Amparo Riesco García de la Torre ; [directores] Antonio López Farré, Santos Casado Pérez. Tesis de la Universidad Complutense de Madrid, Facultad de Farmacia, Departamento de Bioquímica y Biología Molecular, leída el 10-12-1996. La endotelina-1 (et-1) y el oxido nítrico (NO) son dos agentes vasoactivos liberados por el endotelio con un papel conocido en el mantenimiento del tono y la estructura de la pared vascular. En esta tesis estudiamos el papel de estos agentes en la regulación de la actividad de los neutrofilos humanos y en la interacción de estos con el endotelio vascular. La et-1 es capaz de activar los neutrófilos induciendo un aumento en el calcio citosólico ((Ca2+)i), polimerización de los filamentos de actina y liberación de beta-glucuronidasa, pero no produce liberación de anión superóxido (o- 2). La activación de los neutrofilos por et-1 es regulada por el sistema NO/GMPc ya que el aminoácido dador de no, l-arginina, y el 8-br-gmpc inhiben el efecto de la et-1 en el aumento de (Ca2+)i. Este efecto inhibitorio está mediado por la formación de no. La et-1 induce el metabolismo de l-arginina a l-citrulina y no y como consecuencia GMPc a través de un mecanismo dependiente de la disponibilidad de l-arginina en el neutrófilo. La et-1, en condiciones basales no estimula el transportador de l-arginina del neutrófilo que tiene dos componentes uno dependiente de Na+ y otro independiente, sino que sólo se estimula por et-1 en condiciones en las que esta bloqueada la formación de no mediante un inhibidor de la síntesis de no, l-nmma(l-nitro-monometil-l-arginina); revirtiéndose el efecto por 8-br-gmpc, lo que sugiere que la et-1 y el sistema NO/GMPc en el neutrófilo interaccionan mediante un mecanismo de retroregulación negativo como ya ha sido demostrado en otros tejidos. La et-1 induce la adhesión de neutrófilos a células endoteliales en cultivo mediante la expresión de moléculas de adhesión de la familia de las beta2-integrinas en la superficie del neutrófilo. Este efecto también se observo en corazones aislados de conejo y en experimentos in vivo mediante la infusión de et-1 a corazones de conejo. En conclusión, la et-1 es capaz de activar los neutrófilos humanos, esta activación es regulada por el sistema NO/GMPc. El efecto de la et-1 en los neutrofilos esta mas relacionado con los efectos adhesivos o de activación parcial del neutrófilo, sin llegar a producir una activación masiva incluyendo "respiratory burst" ("estallido respiratorio") y producció