MEDIA AND METHODS FOR EXPANSION OF ERYTHROID STEM CELLS FOR THE PRODUCTION OF HEMOGLOBIN

The present invention describes a serum-free medium that promotes the growth and differentiation of erythroid cells, cells that are highly transducible by a non-viral method and genes which increase the growth of erythroid cells and decrease their dependency on Epo. This invention can be used in the expansion of hematopoietic stem cells to produce cultures of erythroid cells as a source of erythroid-specific proteins such as hemoglobin. Hematopoietic stem cells are cultured ex vivo in a serum-free culture medium with the addition of IL-3, SCF and EPO. Cells transfected with the gene described in the present invention can be cultured in the serum-free culture medium with decreased dependency on Epo and other cytokines, thereby reducing the cost of the production of hemoglobin. La présente invention concerne un milieu sans sérum favorisant la croissance et la différenciation de cellules de la lignée érythrocytaire, des cellules hautement transductibles par une méthode non virale et des gènes qui augmentent la croissance des cellules de la lignée érythrocytaire et réduisent leur dépendance envers l'érythropoïétine. La présente invention peut s'utiliser pour l'expansion de cellules souches hématopoïétiques afin de produire des cultures de cellules de la lignée érythrocytaire comme source de protéines spécifiques aux érythrocytes telles que l'hémoglobine. Les cellules souches hématopoïétiques sont cultivées ex vivo dans un milieu de culture sans sérum dans lequel on ajoute IL-3, SCF et de l'érythropoïétine. Les cellules transfectées avec le gène décrit dans la présente invention peuvent être cultivées dans le milieu de culture sans sérum avec une dépendance moindre envers l'érythropoïétine et d'autres cytokines, ce qui réduit le coût de la production d'hémoglobine.