PROCESS FOR OBTAINING AMPLIFIED FRAGMENTS OF NUCLEIC ACID OF VIRAL AND SUB-VIRAL PARTICLES WHICH CONTAIN RNA

The invention relates to a process which comprises capturing on a tube of a thermocycler the viral or sub-viral particles, adding into the tube the reagents which are necessary to carry out the reverse transcription (RT) and the enzymatic amplification by polymerase chain reaction (PCR), introducing the tube into the thermocycler and applying a thermocycle appropriate to effect first the reverse transcription and then the PCR without having to add reagents between both reactions and without having to manipulate the tubes with samples. To this effect, a thermostable DNA polymerase is used in the PCR. The amplified fragments can be subjected to various analyses for detecting, identifying and typing the viral or sub-viral particle. This process can be applied to diagnosis and studies of molecular epidemiology. El procedimiento comprende capturar sobre un tubo de un termociclador las partículas virales o subvirales, añadir al tubo los reactivos necesarios para efectuar la transcripcíon inversa (TR) y la amplificación enzimática por reacción en cadena de la polimerasa (PCR), introducir el tubo en el termociclador y aplicar un ciclo térmico adecuado para efectuar primero la TR y posteriormente la PCR sin necesidad de añadir reactivos entre ambas reacciones ni manipular los tubos con muestras, para lo cual, en la PCR se utiliza une DNA polimerasa termoestable. Los fragmentos amplificados pueden ser sometidos a diversos análisis para detectar, identificar y tipificar la partícula viral o subviral. Este procedimiento tiene aplicación en diagnóstico y estudios de epidemiología molecular. L'invention concerne un procédé consistant à capturer sur un tube d'un thermocycleur les particules virales ou sous-virales, à ajouter au tube les réactifs nécessaires pour effectuer la transcription inverse (TR) et l'amplification enzymatique par réaction en chaîne de la polymérase (PCR), à introduire le tube dans le thermocycleur et à appliquer un cycle thermique adéquat pour effectuer d'abord la TR puis la PCR sans avoir à ajouter des réactifs entre les deux réactions ou à manipuler les tubes avec échantillons. Pour ce faire, on utilise dans la PCR une polymérase à ADN thermostable. Les fragments amplifiés peuvent être soumis à diverses analyses en vue d'une détection, identification, typification de la particule virale ou sous-virale. Ce procédé trouve une application dans le diagnostic et les études en épidémiologie moléculaire.