IMPROVED METHOD FOR CHROMOSOME-SPECIFIC STAINING

The present invention provides a method of staining a chromosome or chromosome region comprising: a) contacting labeled nucleic acid with a region of chromosomal DNA of interest, wherein said labeled nucleic acid comprises fragments substantially complementary to nucleic acid segments within the chromosomal DNA, including both unique sequences of DNA and repetitive sequences; b) hybridizing said labeled nucleic acid to target chromosomes in the absence of blocking DNA allowing both unique sequence and repetitive sequence fragments of the labeled nucleic acid to hybridize; and c) washing said target chromosomes containing bound labeled nucleic acid to differentially remove bound repetitive sequence fragments of the labeled nucleic acid while specific region labeled nucleic acid fragments remain bound to the target chromosomes allowing detection of hybridized labeled nucleic acid containing unique sequences, and wherein the chromosomal DNA is present in a morphologically identifiable chromosome or cell nucleus during the in situ hybridization. La présente invention concerne une technique de coloration d'un chromosome ou d'une région chromosomique qui comprend : (a) une mise en contact d'acide nucléique marqué avec une région souhaitée d'ADN chromosomique, dans laquelle ledit acide nucléique marqué comprend des fragments sensiblement complémentaires des segments d'acide nucléique de l'ADN chromosomique, y compris des séquences uniques d'ADN et des séquences répétitives ; (b) une hybridation dudit acide nucléique avec des chromosomes cibles, en l'absence d'ADN bloquant, qui permet aux deux fragments de séquence unique et répétitive de l'acide nucléique marqué de s'hybrider ; et (c) un lavage desdits chromosomes cibles qui contiennent l'acide nucléique marqué, lié, de manière à éliminer de manière différentielle des fragments de séquence répétitive liés de l'acide nucléique marqué, alors que des fragments de région spécifique de l'acide nucléique marqué restent liés aux chromosomes cibles, ce qui permet de détecter un acide nucléique marqué hybridé contenant des séquences uniques. Dans cette technique, durant l'hybridation in situ, l'ADN chromosomique est présent dans un noyau de cellule ou dans un chromosome morphologiquement identifiables.