ASSAY FOR TOTAL AND DIRECT BILIRUBIN

Methods for assay of both total bilirubin and direct bilirubin in a sample. The inventive methods enable the amounts of total and direct (conjugated) bilirubin to be colorimetrically measured in about 5 minutes, and do not require the precipitation and removal of potentially interfering substances such as proteins prior to analysis. Novel stable reagents that solubilize the bilirubin and intefering substances are also provided. A novel total bilirubin reagent causes the oxidation of the total bilirubin in the sample, and the formation of a light-absorbing bilirubin chromophore detectable in the near-infrared region of the spectrum. A novel direct bilirubin reagent causes the oxidation of the direct bilirubin in the sample, and the formation of a light-absorbing bilirubin chromophore detectable in the near-infrared region of the spectrum, whereas the chromophore formed by the unconjugated bilirubin is substantially colorless. L'invention concerne une technique pour doser la bilirubine totale et la bilirubine glycuro-conjuguée dans un échantillon. Les quantités de bilirubine totale et glycuro-conjuguée sont mesurées par colorimétrie en 5 minutes environ sans qu'il soit nécessaire de procéder à une précipitation et au retrait de composants risquant d'interférer avec le résultat, tels que les protéines, avant l'analyse. L'invention concerne également de nouveaux réactifs stables qui solubilisent la bilirubine et les composants risquant d'interférer. Un nouveau réactif pour la bilirubine totale provoque l'oxydation de la bilirubine totale dans l'échantillon et la formation d'un chromophore de bilirubine absorbant la lumière, qui peut être détecté dans la région infrarouge proche du spectre. Un nouveau réactif pour la bilirubine glycuro-conjuguée provoque l'oxydation de la bilirubine glycuro-conjuguée dans l'échantillon, et la formation d'un chromophore de bilirubine absorbant la lumière, qui peut être détecté dans la région infrarouge proche du spectre, alors que le chromophore formé par la bilirubine non conjuguée est sensiblement incolore.