MONOCLONAL ANTIBODIES AGAINST SOLUBLE TNF- alpha RECEPTORS p55 and p75 AS WELL AS AGAINST TNF- alpha AND ITS ANALOGUES

The present invention belongs to the field of pharmaceutical industry and relates to novel monoclonal antibodies and fragments thereof which are bound to the available surface of a human recombinant TNF- alpha , TNF- alpha analogues and TNF- alpha soluble receptors p55 and p75. Further, the invention relates to stable hybridoma cell lines, which lines are capable of producing such monoclonal antibodies, to a process for the preparation thereof and to pharmaceutical preparations containing them. The invention also relates to a method for the quantitative determination of human TNF- alpha , free or complexed with soluble TNF- alpha receptors p55 and p75, and to a kit used therefor. By hitherto disclosed monoclonal antibodies and reagents developed therefrom, it has not been possible to simultaneously determine free TNF- alpha and its soluble receptors p55 and p75 as well as complexes thereof. Another object of the invention is also the TNF- alpha analogue TNF- alpha Cys95His107His108Cys148, which in a complex with TNF- alpha soluble receptors, is used as an antigen for immunization of mice. La présente invention se rapporte au domaine de l'industrie pharmaceutique et concerne de nouveaux anticorps monoclonaux ainsi que des fragments de ceux-ci, lesquels sont liés à la surface disponible d'un facteur alpha de nécrose tumorale TNF- alpha humain recombiné, d'analogues de TNF- alpha et de récepteurs p55 et p75 solubles de TNF- alpha . En outre, l'invention concerne des lignées cellulaires stables d'hybridome, lesquelles peuvent produire de tels anticorps monoclonaux, un procédé de préparation de ces lignées ainsi que des préparations pharmaceutiques contenant celles-ci. L'invention se rapporte encore à un procédé de détermination quantitative de TNF- alpha , libre ou formant un complexe avec les récepteurs solubles p55 et p75 de TNF- alpha , ainsi qu'à un kit utilisé pour cette détermination. A l'aide des anticorps monoclonaux ici décrits et des réactifs développés à partir de ceux-ci, il n'a pas été possible de déterminer simultanément le TNF- alpha libre, les récepteurs solubles p55 et p75 de TNF- alpha et des complexes de ceux-ci. L'invention porte également sur l'analogue de TNF- alpha , le Cys95His107His108Cys148, que l'on utilise dans un complexe avec des récepteurs solubles de TNF- alpha en tant qu'antigène d'immunisation de souris.