METHOD OF OBTAINING HUMAN-INTERLEUKIN-2 POLYPEPTIDE IN YEAST CELLS

The invention relates to biotechnology and in particular, to genetic engineering methods for obtaining recombinant proteins in yeast cells. The aim of the invention is to increase the level of production of human-interleukin-2 polypeptide in yeast cells as compared with known strains, at a high stab...

Ausführliche Beschreibung

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Bibliographische Detailangaben
Hauptverfasser: GREN, ELMAR YANOVICH, ROMANCHIKOVA, NADEZHDA VIKTOROVNA, TSIMANIS, ALEXANDR JURIEVICH, SMIRNOV, MIKHAIL NIKOLAEVICH, MYASNIKOV, ANDREI NOVOMIROVICH, AVOT, ANDRIS YANOVICH
Format: Patent
Sprache:eng ; rus
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Beschreibung
Zusammenfassung:The invention relates to biotechnology and in particular, to genetic engineering methods for obtaining recombinant proteins in yeast cells. The aim of the invention is to increase the level of production of human-interleukin-2 polypeptide in yeast cells as compared with known strains, at a high stability of the strain-producer. The increased level of production of human interleukin-2 polypeptide in yeast cells and the increased stability of the strain are obtained by improving the construction of the expression plasmid, namely, by deleting a non-coding sequence section of the interleukin-2 gene from the joint area between the yeast promoter and the coding section of the human-interleukin-2 gene, by adding the yeast transcription terminator at the 3'-end of the interleukin-2 gene, as well as by using a shuttle vector having a very high copying capacity in the yeast cells. L'invention concerne la biotechnologie et, notamment, des procédes de génie génétique permettant d'obtenir des protéines recombinées dans des cellules de levure. L'objet de l'invention est d'augmenter le niveau de production de polypeptide d'interleukine-2 humaine dans des cellules de levure, comparé à des souches connues, à une stabilité élevée du producteur de souches. Le niveau augmenté de production de polypeptide d'interleukine-2 humaine dans des cellules de levure, ainsi que la stabilité accrue de la souche, sont obtenus par amélioration de l'élaboration du plasmide d'expression, c'est-à-dire, par suppression d'une section de séquences non codantes du gène d'interleukine-2 de la surface commune entre le promoteur de levure et la section codante du gène d'interleukine-2 humaine, par addition de la terminaison de la transcription de levure à l'extrémité 3' du gène d'interleukine-2, ainsi que par l'emploi d'un vecteur navette ayant une capacité de copie très élevée dans les cellules de levure.