METHOD FOR THE DETERMINATION OF LIPID-BOUND SIALIC ACID CONTENT OF BLOOD

The invention relates to a method for the determination of lipid-bound sialic acid content of blood, primarily of human blood, in which serum is diluted with water, then extracted with a water-immiscible organic solvent or solvent mixture to remove neutral lipids, a lipoprotein fraction containing l...

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Hauptverfasser: PULAY, TAMAS, SCHUMANN, BELA
Format: Patent
Sprache:eng
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Beschreibung
Zusammenfassung:The invention relates to a method for the determination of lipid-bound sialic acid content of blood, primarily of human blood, in which serum is diluted with water, then extracted with a water-immiscible organic solvent or solvent mixture to remove neutral lipids, a lipoprotein fraction containing lipid-bound sialic acid is precipitated from the aqueous phase, the precipitated lipoprotein fraction is redissolved, a mineral acid, a copper(II) salt and resorcine are added to the solution, and the lipid-bound sialic acid content of the serum is calculated on the basis of the colour reaction produced with resorcine. According to the invention a) dextrane with a molecular weight of 10,000 to 20,000 is applied as precipitating agent in a solution with a concentration of 15-35 mg/100 ml and precipitation is performed at a pH of 5.8 to 7.5, or b) polyethylene glycol with a molecular weight of 4,000 to 10,000 is applied as precipitating agent in a solution with a concentration of 15-55 g/100 ml and precipitation is performed at a pH of 9 to 11, or c) a water-soluble manganese(II) salt is applied as precipitating agent in a solution corresponding to a Mn ion concentration of 8.7-13 g/100 ml and precipitation is performed at a pH of 5.5 to 7.5. L'invention concerne un procédé de détermination de la teneur du sang en acide sialique à liaison lipidique, essentiellement du sang humain, consistant à diluer du sérum avec de l'eau, puis à l'extraire à l'aide d'un solvant organique ou d'un mélange de solvants non miscible dans l'eau, afin d'éliminer les lipides neutres. On précipite une fraction de lipoprotéines contenant de l'acide sialique à liaison lipidique à partir de la phase aqueuse, on dissout à nouveau la fraction de lipoprotéines précipitée, on ajoute un acide minéral, un sel de cuivre (II) et de le résorcine à la solution, puis on calcule la teneur du sérum en acide sialique à liaison lipidique sur la base de la réaction colorée produite à l'aide de résorcine. Selon l'invention a) on applique du dextrane dont la masse moléculaire est comprise entre 10 000 et 20 000, comme agent de précipitation dans une solution, à une concentration comprise entre 15 et 35 mg/100 ml, et on procède à la précipitation à un pH compris entre 5,8 et 7,5, ou b) on applique du polyéthylène-glycol dont la masse moléculaire est comprise entre 4 000 et 10 000, comme agent de précipitation dans une solution, à une concentration comprise entre 15 et 55 g/100 ml, et on procède à la précip