COMPOSITIONS AND METHODS FOR PRODUCING REBAUDIOSIDE D AND REBAUDIOSIDE M

The present disclosure provides enzymes and a method to use those enzymes to transfer a sugar moiety to a substrate steviol glycoside. Specifically, designed beta-1,2-glycosyltransferases and sucrose synthases are used in a one-pot reaction to convert stevioside and Reb A into Reb E and Reb D. Additionally, the designed beta-1,2-glycosyltransferases can be used in a one-pot reaction with a sucrose synthase and a beta-1,3-glycosyltransferase to produce Reb M from stevioside and/or Reb A. La présente invention concerne des enzymes et un procédé d'utilisation de ces enzymes pour transférer une fraction de sucre à un substrat, le glycoside de stéviol. Plus particulièrement, les bêta-1,2-glycosyltransférases et les sucrose synthases conçues sont utilisées dans une réaction en un point pour convertir le stévioside et le Reb A en Reb E et Reb D. En outre, les bêta-1,2-glycosyltransférases conçues peuvent être utilisées dans une réaction en un point avec une sucrose synthase et une bêta-1,3-glycosyltransférase pour produire du Reb M à partir du stévioside et/ou du Reb A.