COMPOSITIONS & METHODS FOR UNLINKED ARCHITECT OLIGO-MEDIATED DNA SYNTHESIS

Reductions in costs to read and write DNA have driven advances in our ability to manipulate and engineer biology. However, writing DNA remains a limiting step in testing new hypotheses and engineering novel biological properties. Current synthesis methods lack the speed, low cost, and accessibility to match our current experimental outputs, such as high throughput screening and next generation sequencing. Ideally, DNA synthesis should become as ubiquitous and affordable as PCR. Such a step-change in affordability and accessibility would therefore lead to dramatic improvements in our ability to study and engineer biology. Towards this goal, we have developed a next generation DNA synthesis technology that relies on sequence-filtered, multiplexed ligations to enable template-independent, exponential synthesis of gene- or genome-length DNA. This approach is amenable to cost-effective automation and thus will enable cost-effective DNA "printers" that are as affordable as PCR machines. Des réductions de coûts dans la lecture et l'écriture de l'ADN ont entraîné des avancées dans notre capacité à manipuler et à modifier la biologie. Cependant, l'écriture d'ADN reste une étape contraignante dans le test de nouvelles hypothèses et l'ingénierie de nouvelles propriétés biologiques. Les procédés de synthèse actuels manquent de rapidité et d'accessibilité et sont trop onéreuses pour correspondre à nos résultats d'expériences actuelles, telles qu'un criblage à haut débit et un séquençage de nouvelle génération. Idéalement, la synthèse d'ADN doit devenir une pratique aussi répandue et abordable que la PCR. Un tel changement radical dans l'offre et l'accessibilité conduirait donc à des améliorations spectaculaires dans notre capacité à étudier et modifier la biologie. Afin d'atteindre cet objectif, nous avons développé une technologie de synthèse d'ADN de nouvelle génération qui repose sur des ligatures multiplexées filtrées en séquence pour permettre une synthèse exponentielle indépendante de la matrice d'ADN de longueur de gène ou de génome. La présente approche se prête à une automatisation rentable et rend ainsi possible des "imprimantes" d'ADN rentables qui sont aussi abordables que les machines de PCR.