HIGH-THROUGHPUT AMPLIFICATION OF TARGETED NUCLEIC ACID SEQUENCES

The disclosure pertains to materials and methods for capturing a target nucleic acid sequence, comprising annealing a first target specific oligonucleotide primer to a target sequence; elongating the 3' end of the first target specific oligonucleotide primer to linearly amplify the target nucle...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:
Bibliographische Detailangaben
Hauptverfasser: ROCKWEILER, Tony, MONSMA, Scott, LODES, Michael, WALKER, Jason, MANNA, Dipankar, FAJARDO, Diego, STEINMETZ, Eric
Format: Patent
Sprache:eng ; fre
Schlagworte:
Online-Zugang:Volltext bestellen
Tags: Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Beschreibung
Zusammenfassung:The disclosure pertains to materials and methods for capturing a target nucleic acid sequence, comprising annealing a first target specific oligonucleotide primer to a target sequence; elongating the 3' end of the first target specific oligonucleotide primer to linearly amplify the target nucleic acid sequence. Then, annealing a second target specific oligonucleotide primer to the amplified target sequence; elongating the 3' end of the second target specific oligonucleotide primer to linearly amplify the complement to the target nucleic acid sequence. The resulting copies of the target nucleic acid sequence can be detected or sequenced. A plurality of target nucleic acid sequences from one or more samples can also be captured. Unique identifier sequences can be introduced to track the source of the captured target nucleic acid sequence. The invention also provides kits for performing the methods disclosed herein. La présente invention concerne des matériaux et des procédés de capture d'une séquence d'acide nucléique cible, comprenant le recuit d'une première amorce oligonucléotidique spécifique d'une cible sur une séquence cible ; l'allongement de l'extrémité 3' de la première amorce oligonucléotidique spécifique d'une cible pour amplifier de façon linéaire la séquence d'acide nucléique cible. Ensuite, recuit d'une deuxième amorce oligonucléotidique spécifique de la cible sur la séquence cible amplifiée ; allongement de l'extrémité 3' de la deuxième amorce oligonucléotidique spécifique de la cible pour amplifier linéairement le complément de la séquence d'acide nucléique cible. Les copies résultantes de la séquence d'acide nucléique cible peuvent être détectées ou séquencées. Une pluralité de séquences d'acides nucléiques cibles provenant d'un ou de plusieurs échantillons peuvent également être capturées. Des séquences d'identifiant uniques peuvent être introduites pour suivre la source de la séquence d'acide nucléique cible capturée. L'invention concerne également des kits permettant de mettre en œuvre les procédés de l'invention.