GLYCOSYNTHASE VARIANTS FOR ANTIBODY-DRUG CONJUGATE ENGINEERING

The present disclosure relates to novel glycosynthase enzymes for antibody-drug conjugates (ADCs) engineering. The enzyme variants, termed EndoSd-D232M and EndoSz-D234M, contain the glycan conjugation and/or modification activity at the conserved N297 glycosylation site of Fc region of an exemplary antibody. It has been demonstrated that the glycosynthase activities of EndoSd-D232M and EndoSz-D234M can be applied to various mAbs targeting different receptors, including, but not limited to, Globo H, SSEA-4, SSEA-3 series of receptors (OBI-888; Globo H ganglioside), Herceptin (Her 2 receptor), Peijeta (Her 2 receptor) and Vectibix (EGFR receptor). It has been found that both mAb-GlcNAc and mAb- GlucNAc(F) were suitable substrates for both EndoSd-D232M and EndoSz-D234M. La présente divulgation concerne de nouvelles enzymes glycosynthases pour l'ingénierie des conjugués anticorps-médicament (ADC). Les variants de l'enzyme, appelés EndoSd-D232M et EndoSz-D234M, contiennent l'activité de conjugaison et/ou de modification des glycanes au niveau du site de glycosylation conservé N297 de la région Fc d'un anticorps donné à titre d'exemple. Il a été prouvé que les activités de glycosynthèse de EndoSd-D232M et EndoSz-D234M peuvent être appliquées à divers AcM ciblant différents récepteurs, y compris, mais sans s'y limiter, les récepteurs de la série Globo H, SSEA-4, SSEA-3 (OBI-888; ganglioside Globo H), Herceptin (récepteur Her 2), Peijeta (récepteur Her 2) et Vectibix (récepteur de l'EGFR). Il a été constaté que mAb-GlcNAc et le mAb- GlucNAc(F) étaient des substrats appropriés pour EndoSd-D232M et EndoSz-D234M.