ENUMERATING MICROORGANISMS USING GELABLE, COLD WATER-SOLUBLE MEDIA

Provided are methods for enumerating target microorganisms in a test sample, comprising: retaining a liquid test sample having dissolved therein a nutrient base media component and a glucomannan-containing gelling agent component of a solid cold water-soluble microbiological medium; forming a gelled layer of the dissolved medium; incubating the gelled layer under conditions sufficient for microbial growth and detectable colony formation in and/or on the gelled layer; and enumerating a number of target microorganisms in the test sample by counting the colonies. Preferred gelling agents comprises 5-7 g glucomannan per 100 ml liquid test sample, and optionally comprise a gum(s). Compositions, kits and combinations comprising a nutrient base media and a glucomannan-containing gelling agent, are also provided. The compositions and methods enable enumerating a small number of target microorganisms (e.g., < 1 cell/mL) in a large volume (e.g., 50 ml to 150 mL or larger) of a liquid test sample. L'invention concerne des procédés d'énumération de micro-organismes cibles dans un échantillon de test, comprenant : la retenue d'un échantillon de test liquide dans lequel est dissous un composant de milieu de base nutritif et un composant d'agent gélifiant contenant du glucomannane d'un milieu microbiologique soluble dans l'eau froide solide ; la formation d'une couche gélifiée du milieu dissous ; l'incubation de la couche gélifiée dans des conditions suffisantes pour la croissance microbienne et la formation de colonie détectable dans et/ou sur la couche gélifiée ; et l'énumération d'un certain nombre de micro-organismes cibles dans l'échantillon de test par comptage des colonies. Les agents gélifiants préférés comprennent entre 5 et 7 g de glucomannane pour 100 ml d'échantillon de test liquide, et comprennent éventuellement une ou plusieurs gommes. L'invention concerne également des compositions, des kits et des combinaisons comprenant un milieu de base nutritif et un agent gélifiant contenant du glucomannane. Les compositions et les procédés permettent d'énumérer un petit nombre de micro-organismes cibles (par exemple, < 1 cellule/ml) dans un grand volume (par exemple, de 50 ml à 150 ml ou plus) d'un échantillon de test liquide.