VESICLE LABELING METHOD AND METHOD FOR DETECTING VESICLE-TARGET PROTEIN INTERACTION USING SAME

The present invention relates to a novel protocol for fluorescence imaging and quantification of vesicle-protein interaction (VPI). A salt-change method according to the present invention can label vesicles simply, quickly, and effectively with a small amount of dye compared to conventionally known vesicle-labeling methods. In particular, the salt-change method can completely remove residual dye in a sample, allowing more accurate vesicle observation at a single-vesicle level. In addition, as it has been confirmed that various cell-derived vesicles can be effectively labeled by means of the above method, the present invention can be universally applied to various types of vesicles, ranging from artificial vesicles such as proteoliposomes to natural vesicles. Furthermore, the labeled vesicles can be observed at the single vesicle level using a total internal reflection fluorescence (TIRF) microscope, allowing more accurate detection and quantification of vesicle and protein interactions. Therefore, the present invention provides a novel platform for accurate analysis of the interaction between vesicles and target proteins, and is expected to be used in various fields as a novel means for analyzing the mechanism of action of vesicles. La présente invention concerne un protocole innovant d'imagerie par fluorescence et de quantification de l'interaction vésicule-protéine (VPI). Un procédé de changement de sel selon la présente invention peut marquer des vésicules simplement, rapidement et efficacement avec une petite quantité de colorant par rapport à des procédés de marquage de vésicules classiques. En particulier, le procédé de changement de sel peut éliminer complètement un colorant résiduel dans un échantillon, ce qui permet une observation de vésicules plus précise à l'échelle d'une seule vésicule. De plus, comme il a été confirmé que diverses vésicules dérivées de cellules peuvent être marquées efficacement au moyen du procédé ci-dessus, la présente invention peut être appliquée universellement à divers types de vésicules, allant de vésicules artificielles telles que des protéoliposomes à des vésicules naturelles. En outre, les vésicules marquées peuvent être observées à l'échelle d'une seule vésicule à l'aide d'un microscope à fluorescence à réflexion interne totale (TIRF), ce qui permet une détection et une quantification plus précises d'interactions entre une vésicule et une protéine. Par conséquent, la présente invention concerne une plateforme innov